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CARACTERIZAÇÃO ESTRUTURAL DO MECANISMO DE TRANSPORTE PARA O NÚCLEO CELULAR DE PROTEÍNAS RELACIONADAS METABOLISMO DE GLICOGÊNIO EM Neurospora crassa

Processo: 15/13814-1
Linha de fomento:Bolsas no Brasil - Pós-Doutorado
Vigência (Início): 01 de setembro de 2015
Vigência (Término): 31 de março de 2018
Área do conhecimento:Ciências Biológicas - Biofísica - Biofísica Molecular
Pesquisador responsável:Marcos Roberto de Mattos Fontes
Beneficiário:
Instituição-sede: Instituto de Biociências (IBB). Universidade Estadual Paulista (UNESP). Campus de Botucatu. Botucatu, SP, Brasil
Vinculado ao auxílio:13/24705-3 - O fungo filamentoso Neurospora crassa como um organismo modelo para a caracterização funcional de proteínas/fatores de transcrição que regulam o metabolismo de carboidratos, AP.TEM

Resumo

Dentre as vias de transporte conhecidas que viabilizam o transporte de macromoléculas para dentro ou fora do núcleo através do reconhecimento de sequências de sinalização específicas, a chamada Via Clássica de Importação Nuclear é a mais bem caracterizada. Nesse processo, o estudo estrutural da Importina-± (Imp±) é uma peça chave para o seu entendimento. Assim, esta proteína foi recentemente cristalizada e teve sua estrutura elucidada pelo nosso grupo de pesquisa. Experimentos biofísicos também já foram realizados por nós e mostraram que a proteína conserva algumas características presentes nas isoformas de Mus musculus e Saccharomyces cerevisiae que já tiveram suas estruturas cristalográficas elucidadas. Porém, a NcImp± apresenta aminoácidos não conservados próximos a região do domínio IBB, o que pode estar relacionado com a especificidade da proteína. Então, estamos propondo neste projeto: a) cristalizar e elucidar a estrutura da NcImp± com peptídeos da região ligadora de proteína (região NLS) envolvidas na regulação do metabolismo de glicogênio; b) quantificar a interação dos peptídeos NLS com a NcImp± por experimentos utilizando técnicas de calorimétricas; c) expressar, purificar e caracterizar preliminarmente proteínas envolvidas na regulação do metabolismo de glicogênio da N. crassa. (AU)