| Grant number: | 09/13523-6 |
| Support Opportunities: | Scholarships in Brazil - Master |
| Start date: | August 01, 2010 |
| End date: | January 31, 2012 |
| Field of knowledge: | Agronomical Sciences - Veterinary Medicine - Animal Reproduction |
| Principal Investigator: | Mayra Elena Ortiz D' Avila Assumpcao |
| Grantee: | Fernanda Sevciuc Maria |
| Host Institution: | Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia (FMVZ). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brazil |
Abstract O presente projeto propõe avaliar um aprimoramento da transferência gênica mediada por espermatozóides (TGME) para a produção de animais transgênicos na espécie murina. Apesar, da espécie murina, ser a de eleição para os estudos de TGME por apresentar os melhores resultados na produção de indivíduos positivos para o DNA de interesse, estes ainda não passam de 7%. Uma das explicações é a liberação das endonucleases (MAIONE et al.,1998 e 1997, respectivamente), quando da integração do DNA exógeno. Com base nesta colocação, o presente projeto visa aumentar a eficiência da TGME incorporando ao protocolo um inibidor de endonucleases, o ácido aurintricarboxílico (ATA) e com isso aumentar a integração do DNA exógeno ao embrião. Será realizado ensaio de digestão plasmidial para verificar o potencial do ATA na inibição das endonucleases espermáticas e a avaliação do DNA genômico pelos ensaios Sperm Chromatin Structure Assay (SCSA) e Cometa Alcalino. Para avaliar a eficiência da integração do DNA exógeno ao espermatozóide, o mesmo será submetido à qPCR, sendo quantificado, a porcentagem de DNA integrado aos espermatozóides. | |
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