Molecular characterization of ribonucleoprotein complex containing dFOX-1 in S2 cells of Drosophila melanogaster

• Grant number: 09/17252-7
• Support Opportunities: Scholarships in Brazil - Doctorate
• Start date: March 01, 2010
• End date: October 31, 2013
• Field of knowledge: Biological Sciences - Biochemistry - Molecular Biology
• Principal Investigator: Maria Luisa Paçó-Larson
• Grantee: Gustavo Borges Pereira
• Host Institution: Faculdade de Medicina de Ribeirão Preto (FMRP). Universidade de São Paulo (USP). Ribeirão Preto , SP, Brazil

Abstract

A proteína FOX-1, chamada também de A2BP1, foi identificada inicialmente por interagir com a ataxina-2, o produto do gene associado com a ataxia espinocerebelar humana do tipo 2. FOX-1 é conservada evolutivamente possuindo ortólogas em vários organismos metazoários. Essa família de proteínas caracteriza-se por possuir o domínio RRM, compatível com função relacionada ao metabolismo de RNA. Em C. elegans, estudos genéticos relacionaram Fox-1 com a determinação de sexo, agindo como um repressor pós-transcricional do gene determinante de sexo xol-1. Fox-1 também foi encontrada em regiões do cérebro, tecidos cardíaco e muscular esquelético de camundongos, além de apresentar níveis variados de expressão durante a embriogênese inicial dos murinos. Experimentos in vitro indicam que as proteínas de camundongo e zebrafish controlam splicing alternativo tecido específico. Em D. melanogaster¸ este locus gênico, por nós denominado de dFox-1, ainda não foi caracterizado. Resultados de imunodetecção com anticorpo gerado em nosso laboratório mostram a localização de dFox-1 predominantemente concentrada em focos citoplasmáticos, em células S2R+ e discos imaginais. Este padrão de localização sub-celular é alterado frente a tratamento com ciclohexemida, puromicina e RNase, de modo semelhante ao descrito para proteínas presentes em corpos de processamento de mRNA conhecidos como p-bodies. Considerando a importância dos p-bodies no controle da tradução/estabilidade de mRNAs, neste projeto propomos estender a caracterização da localização sub-celular de dFox-1 nas células S2 de D. melanogaster, e identificar os componentes protéicos e ribonucléicos dos complexos que contêm esse novo membro da família Fox-1.