Development of a new enzymatic assay to identify new antimycobacterium small molecules during latent tuberculosis

• Grant number: 13/01101-5
• Support Opportunities: Scholarships in Brazil - Innovative Research in Small Business - PIPE
• Start date: February 01, 2013
• End date: October 31, 2013
• Field of knowledge: Biological Sciences - Biochemistry - Biochemistry of Microorganisms
• Principal Investigator: Sandra Rodrigues Pereira Faça
• Grantee: Sandra Rodrigues Pereira Faça
• Company: Veritas Biotecnologia Ltda

Abstract

Recentemente foi demonstrada que a degradação de proteínas no proteassoma de micobacterias ocorre de forma análoga a de eucariotos. Esta nova via de degradação de proteínas, a via de pupilação, está diretamente relacionada com a manutenção do Mycobacterium tuberculosis (MTB) na sua fase latente, através da degradação de proteínas defeituosas ou oxidadas decorrente do stress no interior do macrófago. Pessoas com a infecção latente não apresentam os sinais da doença, mas representam a maior fonte da doença, uma vez que a infecção pode ser reativada. Surgem todo ano aproximadamente 9 milhões de novos casos de tuberculose (TB) e aumenta-se também o número de casos resistentes aos antibióticos utilizados no tratamento. Por tudo isso é urgente o desenvolvimento de novas drogas anti-MTB, principalmente aquelas que atuam na fase latente da doença. Durante o desenvolvimento do nosso Projeto PIPE1 (Proc. N. 2008/03003-2), "Construção de um banco de dados proteômico do mycobacterium tuberculosis", identificamos um conjunto de sequências polipeptídicas inéditas contendo sítios de pupilação (pVLS). Algumas destas proteínas estão envolvidas na regulação pós-traducional e/ou na degradação de proteínas danificadas em condições anaeróbicas (que mimetizam o estágio latente). Assim, propomos aqui utilizar os pVLS por nós descobertos como sondas (substratos) para o desenvolvimento de um ensaio enzimático voltado para a identificação de novas drogas (pequenas moléculas) que inibam o processo de pupilação, e assim a manutenção do MTB na fase latente. A inibição do proteassoma bacteriano representa um novo mecanismo bactericida que poderá ser utilizado no tratamento de infecções resistentes à antibióticos convencionais e pode representar uma evolução no tratamento da TB, e consequentemente apresenta grande interesse de saúde pública e também econômico. (AU)