Evaluation of inflammatory mediators, eosinophils interaction and the effect of tyrosine kinase inhibitors in mast cells of patients with sickle cell anemia

• Grant number: 19/20560-7
• Support Opportunities: Scholarships in Brazil - Technical Training Program - Technical Training
• Start date: October 01, 2019
• End date: October 31, 2020
• Field of knowledge: Health Sciences - Medicine - Medical Clinics
• Principal Investigator: Fernando Ferreira Costa
• Grantee: Rebeca Thayna Eiras dos Santos
• Host Institution: Centro de Hematologia e Hemoterapia (HEMOCENTRO). Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP). Campinas , SP, Brazil
• Associated research grant: 14/00984-3 - Red blood cell disorders: pathophysiology and new therapeutic approaches, AP.TEM

Abstract

Os mastócitos são células inflamatórias residentes no tecido conhecidas pelo seu papel na hipersensibilidade alérgica, mas foram recentemente implicadas em várias funções imune, vascular e sensorial, incluindo a dor. Nos últimos anos, a participação dos mastócitos em doenças inflamatórias crônicas, como a artrite reumatoide e esclerose múltipla tem sido cada vez mais descrita e sugerem que os mastócitos podem ser um alvo terapêutico valioso nestas doenças. Recentemente, utilizando o modelo animal transgênico para anemia falciforme, Vincent e colaboradores (2013) mostraram que a ativação e desgranulação dos mastócitos contribuem para fisiopatologia da dor na anemia falciforme e o tratamento desses animais com o inibidor tirosina quinases (imatinibe) melhora a hiperalgesia e previne a hipóxia/reoxigenação nesses animais. No entanto, o envolvimento dessa célula em outras manifestações clínicas da doença ainda não está esclarecido. Os mastócitos e eosinófilos são as principais células da inflamação alérgica, e estudos demonstraram que os mediadores dos mastócitos podem afetar os eosinófilos, e vice-versa. Nosso grupo vem demonstrando que os eosinófilos também têm um papel importante na fisiopatologia da anemia falciforme. Os objetivos desse projeto serão avaliar in vitro os mediadores liberados pelos mastócitos de pacientes com anemia falciforme, a influência do tratamento com inibidores de tirosina quinase na ativação e desgranulação dessas células. Em adição, investigar a influência da interação dos eosinófilos com os mastócitos na ativação celular. Estas análises serão realizadas no equipamento Amnis ImageStream, equipamento que propomos adquirir neste projeto temático atual. O citômetro de fluxo com imagem ImageStream combina a técnica de citometria de fluxo com microscopia ótica e de fluorescência. Assim é possível visualizar cada célula, a sua morfologia e a marcação com imunofluorescência em conjunto com os dados de citometria para cada célula. Assim este equipamento é ideal para investigar a ativação celular. Portanto, o conhecimento do papel dos mastócitos na doença falciforme é de fundamental importância para compreensão da fisiopatologia da doença bem como para o desenvolvimento de novas terapias.