Sequenciamento de última geração de RNAm para análise em larga escala da expressão gênica durante a metamorfose das castas de Apis mellifera

Resumo

A metamorfose dos insetos consiste na transformação de um organismo imaturo em uma forma sexualmente madura, e se caracteriza pela degeneração ou remodelação dos tecidos larvais, enquanto os tecidos dos adultos são formados e se diferenciam a partir de células precursoras localizadas em diferentes regiões do corpo da larva. De nosso conhecimento, análises em grande escala da expressão gênica durante a metamorfose foram realizadas somente em Drosophila utilizando-se microarrays de sequências de cDNA que representaram 30-40% do total de genes preditos do genoma deste inseto-modelo. Estamos propondo aqui uma análise mais abrangente da variação da expressão gênica durante a metamorfose da abelha social Apis mellifera e para isto, utilizaremos da metodologia RNA seq (high-throughput RNA sequencing) para sequenciamento do transcriptoma. Esta análise global tem por finalidade o screening de genes diferencialmente expressos durante etapas precisas da metamorfose. Permitirá ainda, com o auxílio de ferramentas de bioinformática: (1) agrupar estes genes em classes de acordo com potenciais funções, (2) proceder à busca de sítios comuns nas regiões promotoras, passíveis de regulação por fatores de transcrição ou hormônios, que indiquem redes de co-regulação, (3) estabelecer redes hierárquicas de expressão gênica atuantes na metamorfose. Mais ainda, propomos a utilização de operárias e rainhas neste tipo de abordagem, com a finalidade de investigar peculiaridades casta-específicas da atividade gênica durante a transformação da larva em adulto. Espera-se que esta abordagem revele o amplo panorama da genética molecular da metamorfose.