Estudo de mecanismos moleculares na diferenciação e morte de células tumorais desencadeados por peptídeos antimicrobianos

Resumo

Os peptídeos antimicrobianos (PAMs) são moléculas de defesa encontradas em diferentes organismos. Além da atividade antimicrobiana, diferentes trabalhos têm mostrado outras potencialidades desses peptídeos, entre elas a capacidade antitumoral. Nosso grupo descreveu a ação citotóxica dos PAMs com estrutura b-haipin (protegrina, taquiplesina, protegrina e gomesina) e os mecanismos de ação que eles podem desencadear para produzir morte celular na linhagem eritroleucêmica mielóide K562 e outros tipos celulares como melanoma, neuroblastoma e células de ovário de hanster chines. Nós descrevemos que os PAMs acima citados produzem desestruturação direta da membrana com elevadas concentrações, e diferentes tipos de morte com concentrações intermediárias, dependendo do PAM utilizado, apesar de possuírem grande homologia na sua sequencia e na sua estrutura. Neste trabalho pretende-se dar continuidade nos estudos da atividade antileucêmica dos PAMs (protegrina, taquiplesina, protegrina), assim será realizado: 1) Comparação dos efeitos citotóxicos com células normais e tumorais leucêmicas (HL-60, K562 e KG-1) avaliando os eventos moleculares e bioquímicos de morte, e 2) Avaliação da capacidade de diferenciação dos PAMs nas células-tronco leucêmicas presentes nas linhagens leucêmicas (HL-60, K562 e KG-1). 3) Ademais, em base ao nosso estudo anterior onde temos observado diferentes modificações na morfologia celular, pretendemos relacionar estas alterações morfológicas com os efeitos celulares que conduzem à morte utilizando técnicas avançadas de imagem computacional e análises multiparamétricas, por citometria de fluxo e microscopia de fluorescência convencional e confocal nas células de adenocarcinoma HELA. A conectividade entre os dados obtidos das análises de imagens e dos mecanismos de morte dos PAMs, obtidos por análises multiparamétricas, será realizada utilizando ferramentas computacionais/matemáticas.