Análise funcional de microRNAs no desenvolvimento cardíaco de peixes por RNA-seq e genética reversa

Resumo

MicroRNAs (miRNAs) são pequenos RNAs não-codificadores que desempenham papel regulatório em plantas e animais. Essas moléculas atuam pós-transcricionalmente sobre o RNA mensageiro, inibindo a produção proteica. Nos vertebrados, a associação observada entre abundância e diversidade de miRNAs e complexidade do grupo taxonômico, tornaram os miRNAs elementos relevantes para investigações evolutivas. Além disso, miRNAs são reguladores-chave do desenvolvimento e manutenção de tecidos específicos, como o coração. Entretanto, a grande maioria de miRNAs avaliados funcionalmente no desenvolvimento cardíaco de vertebrados se restringe a aves e mamíferos. Em peixes, maior grupo de vertebrados viventes, apenas um pequeno número foi investigado quanto à composição e expressão de miRNAs no genoma. A utilização de espécies de peixes em estudos funcionais de miRNAs no desenvolvimento cardíaco é relevante, uma vez que as vias regulatórias do desenvolvimento cardíaco possuem um padrão ontogenético conservado em vertebrados. No presente projeto propõe-se o uso de RNA-seq para identificação e caracterização de miRNAs no desenvolvimento cardíaco das espécies de peixes zebrafish (Danio rerio) e tilápia do Nilo (Oreochromis niloticus). Ambas espécies tem sido amplamente utilizadas como modelo biológico e possuem o genoma completo sequenciado. Propõe-se também, a partir dos dados produzidos por RNA-seq, a realização de experimentos de genética reversa com a injeção de moléculas sintéticas que mimetizam ou bloqueiam a ação de miRNAs específicos para análise funcional no desenvolvimento cardíaco em peixes. A partir da integração dos dados funcionais gerados aos dados obtidos de outros vertebrados será possível identificar combinações de miRNAs e RNAs mensageiros alvo que estejam associados à evolução da complexidade cardíaca, bem como gerar subsídios para o uso de miRNAs como terapêuticos em doenças cardíacas. (AU)