Dissecando os mecanismos de infectividade em Plasmodium - modelo experimental de Plasmodium yoelii com implicações para o estudo em Plasmodium vivax

Resumo

O Plasmodium vivax é responsável por mais de 80 milhões de casos de malária por ano no mundo, apresentando forte impacto social fora do continente africano, principalmente na Ásia e nas Américas. Além disso, recentemente foi constatado que similarmente às infecções por P. falciparum, infecções por P. vivax também podem evoluir para as formas graves da doença. Todo o processo de invasão é complexo e envolve várias interações entre os ligantes do parasita e receptores de hemácias de forma coordenada. O conhecimento atual sobre os mecanismos e as interações durante a invasão dos eritrócitos pelo parasita são limitados, e isto dificulta o desenvolvimento de abordagens para bloquear esta via essencial na manutenção do ciclo de vida do Plasmodium. Estratégias capazes de bloquear a invasão dos eritrócitos são parte do racional de várias vacinas baseadas em antígenos de merozoítos. Neste sentido, metodologias destinadas a elucidar o fenômeno da invasão facilitariam a validação e identificação de potenciais antígenos que poderiam ser utilizados como alvo no desenvolvimento de vacinas. Estudos associados à biologia de P. vivax, sua patogênese e infectividade ainda são incipientes devido, principalmente, a dificuldade de cultivo contínuo desse parasita e a restrição dos estudos a laboratórios de centros hospitalares localizados em áreas endêmicas de malária e que apresentem uma infraestrutura instalada adequada. P. vivax e P. yoelii usam o antígeno/receptor Duffy para quimiocinas (DARC) como um receptor para a invasão e ambos invadem preferencialmente reticulócitos. Além disso, como P. yoelii apresenta uma via alternativa de infecção, presumivelmente DARC independente, para invadir reticulócitos e P. vivax também tem um mecanismo desconhecido para invadir reticulócitos DARC negativos, é plausível acreditar que rotas alternativas de invasão possam ser compartilhada por estes dois parasitas. Neste sentido, este projeto visa ampliar a compreensão dos mecanismos de patogênese e infectividade de Plasmodium utilizando modelo de infecção experimental com P. yoelii. Sendo assim, pretendemos investigar interações ligante/receptor, identificando potenciais ligantes parasitários e receptores dos eritrócitos (maduros ou reticulócitos) envolvidos em rotas alternativas de invasão. Com este intuito, avaliaremos a infectividade de diferentes transfectantes de P. yoelii 17X com o gene correspondendo a proteínas de superfície deletadas (EBP, DBL, MAEBL, AMA-1, Py235 e RON-2) em eritrócitos e reticulócitos de camundongos Duffy positivos (Dfy+/+) e Duffy negativos (Dfy-/-). A evolução das infecções, resultantes das diferentes combinações das novas populações de parasitas com as células, alvo serão analisadas para caracterização das populações de células alvo infectadas (eritrócitos maduros e reticulócitos) em camundongos Dfy-/- e Dfy+/=. Ainda, para sugerir um via de invasão alternativa a Duffy estudaremos a invasão do parasita em eritrócitos Dfy-/- tratados com anticorpos monoclonais específicos para moléculas de superfície do eritrócito.