Efeito dos ácidos palmítico, oleico e palmitoleico na resposta inflamatória de células endoteliais humanas em cultura.

Resumo

A inflamação crônica contribui para muitas patologias em humanos. Muitas vezes, estas podem estar relacionadas com a dieta, o que sugere que os componentes da dieta podem desencadear ou modificar as respostas inflamatórias. A cultura celular proporciona um sistema controlado para a investigação de compostos específicos, incluindo nutrientes, os quais podem ser testados quanto aos seus efeitos sobre os processos inflamatórios e os seus mecanismos de ação. Células endoteliais da veia umbilical humana (HUVECs) oferecem tais possibilidades, e atualmente, são alvo de pesquisa do professor Philip Calder, na universidade de Southamptom, UK. Tendo em vista que os efeitos do ácido palmitoleico, ainda não foram explorados neste modelo, o presente trabalho objetivará comparar os efeitos deste ácido graxo É-7 com outros ácidos graxos, como ácido palmítico e ácido oleico, sobre processos inflamatórios, identificando novos mecanismos de ação do ácido palmitoléico. Assim, HUVECs serão expostas ao ácido palmítico, oleico ou palmitoleico em concentrações entre 100 e 500 uM, durante um período de 24 horas, tempo suficiente para permitir a incorporação de ácidos gordos para as células. A incorporação dos ácidos graxos vai ser confirmada através de cromatografia de gasosa. As HUVECs serão então expostas a um estímulo inflamatório e em vários períodos de tempos serão estudados: o aparecimento de marcadores de inflamação na sua superfície das células utilizando citometria de fluxo; eventos de sinalização celular por Western Blotting de proteínas-chave; movimentação de proteína dentro da célula por microscopia confocal; as alterações na expressão de genes inflamatórios por RT-PCR. E ainda por ELISA, os sobrenadantes de cultura serão testados para a aparência de citocinas, quimiocinas e mediadores lipídicos (eicosanoides, resolvinas) envolvidos na resposta inflamatória.