Determinação da biodistribuição celular de Cu, Ru e Pt em células humanas tumorais e não tumorais de mama mediante a técnica de espectrometria de massas com plasma acoplado indutivamente

Resumo

O presente projeto centra-se na determinação de baixas concentrações de cobre, rutênio e platina em células tumorais e não tumorais utilizando a espectrometria de massas com plasma acoplado indutivamente (ICP-MS). Foram sintetizados complexos metálicos contendo os ligantes clotrimazol (CT) e trifenilfosfina (PPh3) com as seguintes fórmulas estruturais: [Cu(CTZ)2(PPh3)2]+, [Ru(p-cym)(CTZ)(PPh3)Cl]+ e cis-[Pt(CTZ)(PPh3)2Cl]+. Inicialmente os complexos serão avaliados quanto às suas atividades citotóxicas nas linhagens humanas de mama de tumor (MDA-MB-231) e não tumoral (MCF-10A), sendo que também será determinado o mecanismo de morte mediante análise do ciclo celular e ensaio de apoptose. Posteriormente, as células serão tratadas com os complexos para a determinação da concentração total metálica mediante ICP-MS, estudando os seguintes parâmetros: efeito do tempo, concentração, digestão da amostra assistida por radiação micro-ondas usando diferentes temperaturas e concentrações de HNO3. Todos esses parâmetros serão avaliados para otimizar e estabelecer o tratamento da amostra mais eficiente, que será empregado para a determinação metálica de seis componentes celulares isolados: citosol, membrana plasmática, núcleo, citoesqueleto, DNA e, finalmente, mitocôndria. Os resultados obtidos serão comparados entre si e com dados de literatura, visando uma melhor compreensão do tratamento da amostra que permitirá determinar as regiões celulares do acúmulo metálico responsáveis por suas propriedades biológicas fim de explorar seus mecanismos de ação.