Efeito da via de sinalização PI3K-Akt na maturação oocitária e no desenvolvimento embrionário inicial em bovinos

Resumo

A via de sinalização PI3K-Akt tem papel fundamental no desenvolvimento oocitário regulando importantes funções celulares como a proliferação celular, apoptose, reparo de DNA, metabolismo de glicose e síntese proteica. No ambiente folicular a via da PI3K-Akt já foi descrita como importante para o início do desenvolvimento, para a maturação, para a proliferação das células da granulosa e recentemente, pelo nosso grupo de pesquisa, descrita como sendo fortemente regulada pelos miRNAs das células foliculares e positivamente relacionada à competência oocitária. Este projeto visa compreender melhor a função da via de sinalização PI3K-Akt e as funções celulares reguladas por ela nos complexos cumulus-óocito durante o processo de maturação. Serão utilizadas três abordagens com o objetivo de compreender as consequências da sua ativação/inibição durante a maturação in vitro na produção in vitro de embriões bovinos. A primeira abordagem consistirá na avaliação da influência da maturação in vitro na atividade da via de sinalização PI3K-Akt utilizando amostras de células do cumulus de COCs imaturos, e maturados in vivo e in vitro. Serão avaliados os genes da via propriamente dita e também genes relacionados a diferentes funções celulares e que são regulados por essa via. A segunda e terceira abordagens consistirão na estimulação ou inibição da via PI3K-Akt através de fármacos e biomoléculas (miRNAs) em complexos cumulus-oocitário durante a maturação. Serão avaliados os efeitos celulares (apoptose, metabolismo, síntese protéica e proliferação celular) da ativação/inibição via de sinalização PI3K-Akt em COCs, e será avaliada a influência da modulação dessa via de sinalização durante a maturação nas taxas de maturação (MII), clivagem e de produção de embriões bovinos in vitro. O conhecimento funcional de vias de sinalização como a PI3K-Akt dentro do complexo cumulus-oocitário e como essas vias influenciam na capacidade dos oócitos desenvolverem-se até o estágio de blastocisto é essencial para melhorar os resultados das tecnologias de reprodução assistida além de melhorar a qualidade dos embriões produzidos in vitro.