Mecanismo de ação dos efetores Hippo na regulação da cascata de eventos pré-ovulatórios em bovinos

Resumo

Em humanos e animais, o controle da ovulação, a baixa fertilidade do oócito, a ocorrência de tumores ovarianos e o desenvolvimento de ovários policísticos ou de cistos ovarianos são problemas que necessitam ser elucidados. O conhecimento fisiológico e molecular dos mecanismos relacionados ao crescimento folicular, ovulação e competência oocitária e fundamental para o desenvolvimento de biotecnologias que contribuam para a solução desses e outros problemas relacionados com o processo ovulatório. O entendimento da cascata de eventos nos folículos pré-ovulatórios que tem início no pico ovulatório do hormônio luteinizante (LH) e culminam com a ruptura da parede folicular e a liberação de um complexo cumulus-oócito apto a ser fecundado e essencial em reprodução assistida e processos biotecnológicos. Ao longo dos últimos anos, a cascata de eventos intrafoliculares induzida pelo pico de LH tem sido elucidada, principalmente em relação à expressão de prostaglandina sintase 2 (PTGS2) e o envolvimento de fatores semelhantes ao fator de crescimento epidermal (EGF-like factors): ampiregulina (AREG) e epiregulina (EREG). Esses fatores foram identificados como genes rapidamente induzidos pelo LH nas células da granulosa e pelo EGF nas células do cumulus. Estudos recentes tem indicado que a via de sinalização Hippo exerce um papel importante para a expressão de AREG, EREG e PTGS2 em diferentes tecidos e que a desregulação de YAP (yes-associated protein) e TAZ (transcriptional co-activator with PDZ-binding motif), efetores da via Hippo, esta diretamente associada a distúrbios ovarianos que resultam em anovulação. Além disso, outros estudos também recentes tem demonstrado a associação da via de sinalização PI3K/AKT com a competência oocitária que entre outras atividades mediam a translocação do YAP/TAZ para o núcleo. Por isso, este projeto propõe a investigação da participação dos efetores da via de sinalização celular Hippo e sua relação com a PI3K/AKT no controle da cascata de eventos intrafoliculares que coordenam o processo ovulatório e no controle dos eventos que modulam a qualidade oocitária em bovinos. Assim, experimentos in vitro e in vivo estão sendo propostos com o objetivo de investigar a participação do mecanismo de sinalização celular Hippo e sua relação com a via PI3K/AKT na indução da ovulação e na aquisição da competência oocitária. Para tanto, três modelos experimentais foram desenvolvidos por nossos grupos. Um modelo in vitro, com cultivo de células da granulosa provenientes de folículos dominantes com 10 a 14 mm de diâmetro, os quais expressam os genes essenciais para o controle da ovulação em resposta ao LH; um modelo ex vivo, utilizando cultivo ovariano; e um modelo in vivo, modificando o ambiente folicular através de injeção intrafolicular guiada por ultrassom. Experimentando estes modelos esperamos entender mecanismos envolvidos nos processos de ovulação e aquisição da competência oocitária, identificando o papel dos efetores da via de sinalização celular Hippo e sua relação com a enzima AKT e mecanismos de proliferação celular. Esse conhecimento devera ser a base para o melhor entendimento de processo celulares ligados ao controle da ovulação, a competência oocitária e o desenvolvimento de tumores e cistos ovarianos em animais e humanos. (AU)