Construção e seleção de uma biblioteca de anticorpos monoclonais scFv contra a proteína spike de variantes de preocupação do SARS-CoV-2 pela tecnologia de Phage Display

Resumo

Os anticorpos são moléculas importantes para entender e combater a pandemia de COVID-19. Eles desempenham várias funções, incluindo a eliminação do vírus em pacientes infectados, a chave para diagnósticos rápidos, o tratamento inicial para pacientes hospitalizados e o principal objetivo das vacinas. As vacinas e anticorpos terapêuticos disponíveis atualmente foram desenvolvidos a partir da proteína spike de variantes do SARS-CoV-2 que circulavam durante as primeiras fases da pandemia em 2020. No entanto, novas variantes de preocupação, que surgiram de mutações no sítio de ligação do receptor (RBD) da proteína spike, levantam preocupações sobre a eficácia da resposta de anticorpos neutralizantes e programas de vacinação. Nesse contexto, o objetivo desta proposta é gerar anticorpos monoclonais contra a proteína spike de variantes de preocupação para imunoterapia e prevenção da COVID-19. Até o momento, não existem anticorpos contra essas novas variantes, e o desenvolvimento de um insumo nacional para o combate à pandemia é extremamente importante. Os anticorpos serão selecionados a partir de uma biblioteca de fragmentos de anticorpos scFv usando a tecnologia de Phage display. Os anticorpos mais reativos serão produzidos no formato scFv-Fc em células HEK-293 de mamífero e, posteriormente, serão realizadas análises funcionais, como a análise do potencial neutralizante dos anticorpos com relação ao vírus e análises in silico para caracterização da interação antígeno-anticorpo. Espera-se que este estudo forneça um banco de anticorpos neutralizantes ao vírus SARS-CoV-2 que possam contribuir para o desenvolvimento de imunoterapias efetivas no manejo clínico de pacientes com COVID-19 em futuro breve.