Análise mecanístico-funcional do microRNA 1914-5p no processo pró-esteatótico hepático não alcoólico em cultura celular

• Processo: 18/05286-3
• Modalidade de apoio: Auxílio à Pesquisa - Regular
• Data de Início da vigência: 01 de junho de 2018
• Data de Término da vigência: 30 de novembro de 2020
• Área do conhecimento: Ciências Biológicas - Genética - Genética Molecular e de Microorganismos
• Pesquisador responsável: Karen Cristiane Martinez de Moraes
• Beneficiário: Karen Cristiane Martinez de Moraes
• Instituição Sede: Instituto de Biociências (IB). Universidade Estadual Paulista (UNESP). Campus de Rio Claro. Rio Claro , SP, Brasil
• Auxílio(s) vinculado(s): 19/16406-2 - A mosca de fruta Drosophila melanogaster como um modelo animal alternativo para a investigação translacional de mecanismos moleculares de doenças humanas hepáticas, AP.R SPRINT
• Assunto(s): Regulação da expressão gênica
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Análise mecanístico-funcional da atuação de miRNAs | cromatografia gasosa acoplada a espectrometria de massa (GC | esteatose hepática não alcoólica e modelo celular | investigação proteômica | Ms) | Regulação gênica | validação funcional de proteínas: silenciamento e superexpressão gênic | Genética molecular correlacionada a doenças humanas

Resumo

Atualmente, as doenças hepáticas de acúmulo de gordura e não alcoólicas (NAFLD) são consideradas um problema de saúde pública mundial. Essas patogenias se caracterizam pelo acúmulo excessivo de gordura no fígado causado por diferentes etiologias, cujos aspectos moleculares que subsidiam a progressão das NAFLD a estágios mais avançados ainda não se encontram completamente elucidados. Em proposta anterior apoiada pela FAPESP, nosso grupo de pesquisa caracterizou o microRNA-1914-5p como responsivo ao tratamento com o peptídeo angiotensina-(1-7) e como um elemento modulador do metabolismo de lipídeos em células estreladas hepáticas (HSCs) LX-2, que atuam diretamente no estabelecimento da fibrogênese hepática. Sendo assim, caracterizar a atuação funcional do miR-1914-5p no processo esteatótico hepático é relevante, pois poderá contribuir com estratégias terapêuticas futuras. Para isso, modelos celulares simuladores de esteatose serão estabelecidos, utilizando-se linhagens de hepatócitos em cocultivo com LX-2, que serão transfectadas com moléculas mimetizadora e/ ou inibidora do miR-1914-5p. Ensaios celulares e moleculares subsequentes viabilizarão o estudo dos efeitos das pequenas moléculas na fisiopatologia celular. Entre esses ensaios, uma avaliação do perfil da produção de triacilgliceróis e moléculas de colesterol nas culturas por cromatografia gasosa acoplada a espectrometria de massa (GC-MS) será fundamental para a escolha do modelo de esteatose a ser utilizado nas etapas subsequentes dessa proposta. Para se avaliar o efeitos globais do miR-1914-5p em nosso modelo, a metodologia da proteômica shotgun será realizada, visando a caracterização de moléculas chaves na patologia e que são moduladas de maneira direta ou indeireta pelo miRNA em análise. A validação funcional de tais proteínas se dará em ensaios de Western blot, bioquímicos e pelo silenciamento ou superexpressão gênica. (AU)

Publicações científicas

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(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)

SILVA, CAIO MATEUS; FERRARI, GUSTAVO DUARTE; ALBERICI, LUCIANE CARLA; MALASPINA, OSMAR; MORAES, KAREN C. M.. Cellular and molecular effects of silymarin on the transdifferentiation processes of LX-2 cells and its connection with lipid metabolism. Molecular and Cellular Biochemistry, v. 468, n. 1-2, MAR 2020. (18/05286-3, 16/23509-4)

RAMOS, LETICIA F.; SILVA, CAIO M.; PANSA, CAMILA C.; MORAES, KAREN C. M.. Non-alcoholic fatty liver disease: molecular and cellular interplays of the lipid metabolism in a steatotic liver. EXPERT REVIEW OF GASTROENTEROLOGY & HEPATOLOGY, v. 15, n. 1, p. 25-40, JAN 2 2021. (18/05286-3)

DA SILVEIRA, MARINA BONFOGO; PANSA, CAMILA CRISTIANE; MALASPINA, OSMAR; MORAES, KAREN C. M.. The functional activity of the miR-1914-5p in lipid metabolism of the hepatocarcinoma cell line HepG2: a potential molecular tool for controlling hepatic cellular migration. MOLECULAR BIOLOGY REPORTS, v. 48, n. 4, p. 3463-3474, APR 2021. (18/05286-3, 13/21186-5)

FABIANO CLÁUDIO DE OLIVEIRA-JÚNIOR; ANA CAROLINE PIMENTEL DE OLIVEIRA; CAMILA CRISTIANE PANSA; LETÍCIA RAMOS MOLICA; KAREN C. M. MORAES. Drosophila melanogaster as a Biotechnological Tool to Investigate the Close Connection Between Fatty Diseases and Pesticides. Brazilian Archives of Biology and Technology, v. 67, 2024-03-22. (22/06302-8, 18/05286-3)

MORAES, KAREN C. M.; MONTAGNE, JACQUES. Drosophila melanogaster: A Powerful Tiny Animal Model for the Study of Metabolic Hepatic Diseases. FRONTIERS IN PHYSIOLOGY, v. 12, SEP 16 2021. (19/16406-2, 18/05286-3)

MIRANDA, JULIANA F.; SCARINCI, LETICIA D.; RAMOS, LETICIA F.; SILVA, CAIO M.; GONCALVES, LETICIA R.; DE MORAIS, PRISCILA F.; MALASPINA, OSMAR; MORAES, KAREN C. M.. The modulatory effect of triclosan on the reversion of the activated phenotype of LX-2 hepatic stellate cells. JOURNAL OF BIOCHEMICAL AND MOLECULAR TOXICOLOGY, v. 34, n. 1, JAN 2020. (13/21186-5, 18/05286-3)