Investigação do mecanismo de ação da HJURP (Holliday Junction Recognizing Protein) no reparo de DNA em células de glioblastoma

• Processo: 18/05018-9
• Modalidade de apoio: Auxílio à Pesquisa - Regular
• Vigência: 01 de julho de 2018 - 30 de junho de 2021
• Área do conhecimento: Ciências Biológicas - Morfologia - Citologia e Biologia Celular
• Pesquisador responsável: Valeria Valente
• Beneficiário: Valeria Valente
• Instituição Sede: Faculdade de Ciências Farmacêuticas (FCFAR). Universidade Estadual Paulista (UNESP). Campus de Araraquara. Araraquara , SP, Brasil
• Pesquisadores associados: Wilson Araújo da Silva Junior
• Auxílios(s) vinculado(s): 21/04537-5 - Padrões de expressão de linhagens celulares de glioblastoma revelam novos genes de matriz extracelular e receptores correlacionados com a resposta dos pacientes com glioma à radiação ionizante, PUB.ART
• Assunto(s): Reparo do DNA Instabilidade genômica Glioblastoma Astrocitoma
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: astrocitomas | estrutura da cromatina | glioblastoma | Hjurp | instabilidade genômica | reparo de DNA | Reparo de DNA no câncer

Resumo

Os astrocitomas compreendem os tumores cerebrais primários mais comuns em adultos. Eles são classificados em astrocitoma difuso (grau II), anaplásico (grau III) e glioblastoma (grau IV). Dentre eles, o glioblastoma (GBM) é o tipo mais frequente e agressivo, sendo que a maioria dos pacientes apresenta sobrevida de aproximadamente um ano. Isto se deve à alta invasividade e resistência das células a radio e quimioterapia. Estudos recentes têm revelado que sua caracterização molecular é fundamental para a obtenção de diagnósticos mais precisos e o desenvolvimento de terapias mais eficazes. Dentro deste contexto, observamos em estudos prévios que a proteína HJURP (Holliday Junction Recognizing Protein) está altamente superexpressa nos GBMs e mostra forte correlação com prognóstico. Vimos ainda que a redução de HJURP promove drástico aumento nos níveis de morte celular de diversas linhagens celulares de GBM, enquanto que astrócitos e fibroblastos não tumorais não são significativamente afetados. HJURP foi originalmente associada ao reparo de quebras de dupla fita de DNA, porém esta função ainda não está bem caracterizada. Kato e colegas (2007) relataram aumento de expressão de HJURP após o estresse genotóxico e a sua interação com proteínas do complexo MRN, atuante no reconhecimento de lesões no DNA. No entanto, desde então não há relatos adicionais que corroborem esta função. HJURP atua também como chaperona da variante centromérica da histona H3 (CENP-A), realizando o carregamento desta proteína na cromatina centromérica. Esta atividade é muito bem estabelecida e bastante caracterizada. Vários trabalhos descrevem os mecanismos, domínios proteicos envolvidos e a regulação deste processo no ciclo celular. Dados preliminares de nosso grupo, em colaboração com o Dr. Brendan D. Price (Dana-Farber Cancer Institute - Harvard University), revelaram o recrutamento de HJURP para sítios de quebra de dupla fita de DNA nos momentos iniciais da resposta celular à lesão, confirmando sua atuação no reparo de DNA. Desse modo, pretendemos elucidar os mecanismos de atuação da HJURP no processo de reparo e na resistência de células de GBM frente à radiação ionizante, em um estudo inédito sobre o tema. Para isso, propomos: i) confirmar o requerimento de HJURP para a atividade de reparo de DNA, ii) investigar a participação de HJURP nas vias de reparo através de recombinação homóloga e\ou junção de extremidades não-homólogas, iii) dissecar em qual etapa do processo HJURP atua, iv) avaliar o impacto da redução dos níveis de HJURP na eficiência de reparo após tratamento com radiação ionizante, v) investigar se a presença de HJURP nos locais de lesão está envolvida com remodelamento da cromatina. (AU)

Publicações científicas

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(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)

SERAFIM, RODOLFO BORTOLOZO; DA SILVA, PATRICK; CARDOSO, CIBELE; DI CRISTOFARO, LUIS FERNANDO MACEDO; NETTO, RENATO PETITTO; DE ALMEIDA, RODRIGO; NAVEGANTE, GEOVANA; STORTI, CAMILA BALDIN; DE SOUSA, JULIANA FERREIRA; DE SOUZA, FELIPE CANTO; et al. Expression Profiling of Glioblastoma Cell Lines Reveals Novel Extracellular Matrix-Receptor Genes Correlated With the Responsiveness of Glioma Patients to Ionizing Radiation. FRONTIERS IN ONCOLOGY, v. 11, MAY 25 2021. (13/08135-2, 18/05018-9, 13/13465-1, 19/24335-8, 18/22799-4, 16/12744-2, 17/15208-7)

JULIANA FERREIRA DE SOUSA; RODOLFO BORTOLOZO SERAFIM; LAURA MARISE DE FREITAS; CARLA RAQUEL FONTANA; VALERIA VALENTE. DNA repair genes in astrocytoma tumorigenesis, progression and therapy resistance. GENETICS AND MOLECULAR BIOLOGY, v. 43, n. 1, 2019-12-13. (16/05345-4, 13/13465-1, 14/24581-5, 18/05018-9, 13/08135-2)

DE SOUSA, JULIANA FERREIRA; SERAFIM, RODOLFO BORTOLOZO; DE FREITAS, LAURA MARISE; FONTANA, CARLA RAQUEL; VALENTE, VALERIA. DNA repair genes in astrocytoma tumorigenesis, progression and therapy resistance. GENETICS AND MOLECULAR BIOLOGY, v. 43, n. 1, 1, 2020. (16/05345-4, 13/13465-1, 14/24581-5, 18/05018-9, 13/08135-2)

DE SOUSA, JULIANA FERREIRA; DA SILVA, PATRICK; SERAFIM, RODOLFO BORTOLOZO; NOCITI, RICARDO PERECIN; MOREIRA, CRISTIANO GALLINA; SILVA, WILSON ARAUJO; VALENTE, VALERIA. RNA sequencing data of different grade astrocytoma cell lines. DATA IN BRIEF, v. 34, FEB 2021. (13/08135-2, 13/13465-1, 18/05018-9)