Análise da expressão gênica e síntese proteica de células derivadas da polpa de dentes decíduos após o uso do Laser de Baixa Intensidade.

• Processo: 18/20316-6
• Modalidade de apoio: Auxílio à Pesquisa - Regular
• Vigência: 01 de fevereiro de 2019 - 31 de janeiro de 2021
• Área do conhecimento: Ciências da Saúde - Odontologia - Odontopediatria
• Pesquisador responsável: Thais Marchini de Oliveira Valarelli
• Beneficiário: Thais Marchini de Oliveira Valarelli
• Instituição Sede: Faculdade de Odontologia de Bauru (FOB). Universidade de São Paulo (USP). Bauru , SP, Brasil
• Assunto(s): Síntese proteica Células-tronco da polpa dentária Terapia a laser de baixa intensidade Expressão gênica Laser de baixa intensidade
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Células da Polpa Dentária | Dentes decíduous | expressão gênica | laser de baixa intensidade | Síntese Protéica | Odontopediatria

Resumo

O objetivo do presente projeto será avaliar o efeito do laser de baixa potência na viabilidade, proliferação celular, expressão gênica e síntese proteica de células derivadas da polpa de dentes decíduos humanos, após a variação dos parâmetros de fotobiomodulação. Amostras celulares serão cultivadas em meio de cultura suplementado com 10% de Soro Fetal Bovino e após a 4ª passagem serão irradiadas com o Laser de Baixa Intensidade fosfeto de índio-gálio-alumínio no comprimento de onda de 660nm. Os grupos serão divididos de acordo com o protocolo de fotobiomodulação variando-se a Potência e o Tempo de Irradiação, obtendo-se densidades de energia diferentes (1,2 a 6,2 J/cm2). Os grupos controles de cada experimento serão tratados sob condições idênticas, exceto que o dispositivo laser será mantido desligado durante o experimento. Será realizada análise da viabilidade (ensaio MTT) e proliferação celular (ensaio cristal violeta), em 6, 12 e 24 horas após a irradiação. A expressão gênica dos fatores de crescimento angiogênicos (VEGF-A, VEGF-C, VEGF-D, VEGFR1, VEGFR2, FGF2, PLGF, PDGF, PECAM-1 e BMP-9) será quantificada no lisado celular por RT-PCR em 6, 12, e 24 horas após a irradiação. A síntese proteica dos mesmos fatores de crescimento será quantificada no sobrenadante e lisado celular por ensaio multiplex ELISA em 6, 12 e 24 horas após a irradiação. Os valores serão analisados pela média das três repetições de cada experimento. As médias e desvio padrão serão testados quanto a normalidade dos dados. Se os dados apresentarem distribuição normal, comparação intragrupos e intergrupos será realizada pela ANOVA a dois critérios, seguido pelo teste de Tukey. Se os dados não apresentarem distribuição normal, a comparação intragrupos será realizada pelo Teste de Friedman e a comparação intergrupos será realizada pelo teste de Kruskal-Wallis. Será adotado nível de significância de 5% para que as diferenças sejam consideradas estatisticamente significativas. (AU)

Publicações científicas

(5)

(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)

BERGAMO, MARIEL TAVARES; VITOR, LUCIANA LOURENCO RIBEIRO; DIONISIO, THIAGO JOSE; MARQUES, NADIA CAROLINA TEIXEIRA; OLIVEIRA, RODRIGO CARDOSO; AMBROSIO, ELOA CRISTINA PASSUCCI; SAKAI, VIVIEN THIEMY; SANTOS, CARLOS FERREIRA; LOURENCO NETO, NATALINO; MACHADO, MARIA APARECIDA ANDRADE MOREIRA; et al. Could the photobiomodulation therapy induce angiogenic growth factors expression from dental pulp cells?. Lasers in Medical Science, APR 2021. (18/20316-6, 17/11396-3)

RIBEIRO VITOR, LUCIANA LOURENCO; OLIVEIRA PRADO BERGAMO, MARIEL TAVARES; LOURENCO-NETO, NATALINO; SAKAI, VIVIEN THIEMY; OLIVEIRA, RODRIGO CARDOSO; CRUVINEL, THIAGO; RIOS, DANIELA; GARLET, GUSTAVO POMPERMAIER; SANTOS, CARLOS FERREIRA; ANDRADE MOREIRA MACHADO, MARIA APARECIDA; et al. Photobiomodulation effect on angiogenic proteins produced and released by dental pulp cells. CLINICAL ORAL INVESTIGATIONS, v. 24, n. 12, APR 2020. (18/20316-6)

BERGAMO, MARIEL TAVARES; VITOR, LUCIANA LOURENCO RIBEIRO; DIONISIO, THIAGO JOSE; MARQUES, NADIA CAROLINA TEIXEIRA; OLIVEIRA, RODRIGO CARDOSO; AMBROSIO, ELOA CRISTINA PASSUCCI; SAKAI, VIVIEN THIEMY; SANTOS, CARLOS FERREIRA; LOURENCO NETO, NATALINO; MACHADO, MARIA APARECIDA ANDRADE MOREIRA; et al. Could the photobiomodulation therapy induce angiogenic growth factors expression from dental pulp cells?. Lasers in Medical Science, v. 36, n. 8, p. 1751-1758, OCT 2021. (17/11396-3, 18/20316-6)

OLIVEIRA PRADO BERGAMO, MARIEL TAVARES; RIBEIRO VITOR, LUCIANA LOURENCO; LOPES, NATHALIA MARTINS; LOURENCO NETO, NATALINO; DIONISIO, THIAGO JOSE; OLIVEIRA, RODRIGO CARDOSO; RODINI, CAMILA OLIVEIRA; SANTOS, CARLOS FERREIRA; ANDRADE MOREIRA MACHADO, MARIA APARECIDA; OLIVEIRA, THAIS MARCHINI. Angiogenic protein synthesis after photobiomodulation therapy on SHED: a preliminary study. Lasers in Medical Science, v. 35, n. 9, FEB 2020. (17/11396-3, 18/20316-6)

RIBEIRO VITOR, LUCIANA LOURENCO; OLIVEIRA PRADO, MARIEL TAVARES; NETO, NATALINO LOURENCO; OLIVEIRA, RODRIGO CARDOSO; SAKAI, VIVIEN THIEMY; SANTOS, CARLOS FERREIRA; DIONISIO, THIAGO JOSE; RIOS, DANIELA; CRUVINEL, THIAGO; ANDRADE MOREIRA MACHADO, MARIA APARECIDA; et al. Does photobiomodulation change the synthesis and secretion of angiogenic proteins by different pulp cell lineages?. JOURNAL OF PHOTOCHEMISTRY AND PHOTOBIOLOGY B-BIOLOGY, v. 203, JAN 2020. (18/20316-6, 13/18886-5)