Papel do Fator de Necrose Tumoral Alfa (TNF-a) Endógeno no Potencial Osteogênico de Células-Tronco Mesenquimais Derivadas de Tecido Adiposo

• Processo: 18/04655-5
• Modalidade de apoio: Auxílio à Pesquisa - Regular
• Data de Início da vigência: 01 de março de 2019
• Data de Término da vigência: 31 de dezembro de 2021
• Área do conhecimento: Ciências da Saúde - Odontologia - Cirurgia Buco-maxilo-facial
• Pesquisador responsável: Emanuela Prado Ferraz
• Beneficiário: Emanuela Prado Ferraz
• Instituição Sede: Faculdade de Odontologia (FO). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
• Pesquisadores associados: Marcia Martins Marques ; Márcio Mateus Beloti ; Maria Cristina Zindel Deboni
• Assunto(s): Fator de necrose tumoral alfa Cirurgia Tecido adiposo Osteoblastos Regeneração óssea Terapia baseada em transplante de células e tecidos Células-tronco mesenquimais
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: célula-tronco mesenquimal | fator de necrose tumoral alfa | osteoblasto | regeneração óssea | Tecido adiposo | terapia celular | Cirurgia

Resumo

A terapia celular tem sido proposta como uma estratégia para o tratamento de defeitos ósseos, constituindo uma abordagem de interesse para a Odontologia e a Medicina. Dentre os diferentes tipos celulares que podem ser empregados, as células-tronco mesenquimais derivadas do tecido adiposo (CTM-TA) surgem como uma alternativa pela sua facilidade de obtenção associada à menor morbidade, comparadas às células derivadas da medula óssea (CTM-MO). Contudo, às CTM-TA têm sido atribuído menor potencial osteogênico. Resultados prévios evidenciaram a diminuição da diferenciação osteoblástica induzida pelo fator de necrose tumoral alfa (TNF-) liberado por adipócitos. Assim, nossa hipótese é que o TNF- produzido e liberado pelas CTM-TA tenha efeito inibitório na diferenciação osteoblástica destas células. Nesse contexto, o objetivo do presente projeto é investigar o papel do TNF- endógeno no potencial osteogênico das CTM-TA. Ratos Wistar serão utilizados para obtenção de CTM-TA, que serão avaliadas quanto a expressão temporal gênica e proteica de TNF- e seus receptores TNFR1A e TNFR1B. Em seguida, as CTM-TA serão transfectadas com clones de shRNA para os receptores isoladamente ou associados e avaliadas com relação à diferenciação osteoblástica por: 1) expressão dos genes fosfatase alcalina (ALP), RUNX2, osteopontina (OPN) e osteocalcina (OC); 2) atividade de ALP e 3) produção de matriz extracelular mineralizada. Como parâmetro para a diferenciação osteoblástica, serão utilizadas CTMs-MO obtidas dos mesmos animais. Para avaliar o efeito do silenciamento de TNF-± no reparo ósseo, as CTM-TA silenciadas que apresentarem resultados mais evidentes em termos de diferenciação osteoblástica, serão injetadas em defeitos ósseos criados em calvárias de ratos e o reparo avaliado após 4 semanas por meio de microtomografia computadorizada e análise histológica. Os resultados desse estudo podem contribuir para o entendimento dos mecanismos intracelulares envolvidos na diferenciação e atividade de células osteoblásticas derivadas de CTM-TA, e contribuir na aplicação e o desenvolvimento de novas estratégias de tratamento envolvendo terapia celular na regeneração óssea. (AU)

Publicações científicas

(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)

BIGHETTI-TREVISAN, RAYANA LONGO; BUENO, NATALIA; SANCHEZ, GIOVANA; FREITAS, GILEADE; BELOTI, MARCIO; FERRAZ, EMANUELA. Tumor Necrosis Factor Alpha Impairs Osteoblast Differentiation of Mesenchymal Stromal Cells Derived from Adipose Tissue. Journal of Bone and Mineral Research, v. 37, p. 1-pg., 2022-02-01. (19/14680-0, 18/04655-5)