Avaliação do papel de RASSF9 em melanoma através do sistema CRISPR/Cas9

• Processo: 18/25395-1
• Modalidade de apoio: Auxílio à Pesquisa - Regular
• Data de Início da vigência: 01 de abril de 2019
• Data de Término da vigência: 31 de março de 2021
• Área do conhecimento: Ciências Biológicas - Morfologia - Citologia e Biologia Celular
• Pesquisador responsável: João Gustavo Pessini Amarante Mendes
• Beneficiário: João Gustavo Pessini Amarante Mendes
• Instituição Sede: Instituto de Ciências Biomédicas (ICB). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
• Assunto(s): Repetições palindrômicas curtas agrupadas e regularmente espaçadas Transformação celular neoplásica Melanoma Neoplasias Oncologia experimental Proteína 9 associada à CRISPR
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: câncer | Cas9 | Crispr | melanoma | Rassf9 | tumorigenese | oncologia experimental

Resumo

O melanoma é o tipo mais letal de câncer de pele, originado pela transformação de melanócitos, células que promovem a pigmentação da pele. Podemos dividir o melanoma em quatro grupos distintos, sendo que os dois mais incidentes apresentam sequências modificadas das proteínas B-Raf (52%) e Ras (28%). Ras é a proteína mais alterada em tumores sólidos e seus efetores podem ser bons alvos terapêuticos no tratamento dos pacientes. Membros da família RASSF (Ras-association Family) foram caracterizados por sua participação na indução de apoptose mediada pela ativação de Ras. Essa família gênica é subdividida em dois sub-grupos, o primeiro composto pelo membros RASSF1-6 apresentam o motivo de interação à Ras na porção C-terminal, são os membros mais estudados da família. Enquanto que os membros RASSF7-10 apresentam o domínio RalGDS/AF6 na porção N-terminal e há poucas informações sobre funções dessas proteínas. Em câncer essas proteínas tem sua expressão frequentemente suprimida através de hipermetilação de seus promotores. RASSF9 foi primeiramente descrito como P-CIP1, uma proteína relacionada com transporte de vesículas. Essa proteína é capaz de interagir com H-, N- e R-Ras e com ASPP1/2 durante a segregação cromossomal. Além disso, RASSF9 é crucial para homeostase epidermal e é induzida por exposição solar. Entretanto, não há dados a cerca da função e importância dessa proteína em melanoma. Nesse projeto, temos por objetivo entender a ação de RASSF9 em uma linhagem de melanoma não metastático. Para tanto, realizaremos nocaute com o sistema CRISPR/Cas9 seguido por caracterização das alterações na capacidade invasiva e proliferativa in vitro e in vivo. Além disso, avaliaremos a resistência a quimioterápicos e possíveis alterações em vias metabólicas decorrentes da ausência de RASSF9. Com esse trabalho pretendemos determinar a participação de RASSF9 em diferentes aspectos necessários para o estabelecimento e progressão do melanoma. (AU)

Publicações científicas

(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)

AMARANTE-MENDES, GUSTAVO P.; RANA, AAMIR; DATOGUIA, TARCILA SANTOS; HAMERSCHLAK, NELSON; BRUMATTI, GABRIELA. CR-ABL1 Tyrosine Kinase Complex Signaling Transduction: Challenges to Overcome Resistance in Chronic Myeloid Leukemi. HARMACEUTIC, v. 14, n. 1, JAN 2022. (15/09568-5, 18/25395-1)

BRUMATTI, GABRIELA; KALONI, DEEKSHA; CASTRO, FABIOLA ATTIE; AMARANTE-MENDES, GUSTAVO P.. BH3 mimetics and TKI combined therapy for Chronic Myeloid Leukemia. Biochemical Journal, v. 480, n. 2, p. 16-pg., 2023-01-01. (18/25395-1)