Ensaios pré-clínicos de proteoformas de asparaginase glicoproteicas ou resistentes a proteases séricas.

• Processo: 18/15104-0
• Modalidade de apoio: Auxílio à Pesquisa - Regular
• Vigência: 01 de abril de 2019 - 31 de março de 2022
• Área do conhecimento: Ciências da Saúde - Farmácia
• Pesquisador responsável: Gisele Monteiro
• Beneficiário: Gisele Monteiro
• Instituição Sede: Faculdade de Ciências Farmacêuticas (FCF). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
• Assunto(s): Asparaginase Leucemia-linfoma linfoblástico de células precursoras Biofármacos Biotecnologia farmacêutica
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: asparaginase | Biofármaco | imunogenicidade de biofármaco | Leucemia linfoide aguda | meia-vida sérica | Biotecnologia Farmacêutica

Resumo

A Leucemia Linfóide Aguda (LLA) é o câncer de maior incidência na faixa etária de 3 a 5 anos. A terapia para o tratamento de LLA utiliza, entre outras drogas, a enzima L-asparaginase bacteriana de Escherichia coli (Ec_ASNase) e como segunda opção a de D. chrysanthemi (Er_ASNase). Reações imunogênicas são os principais efeitos colaterais, e a formação de anticorpos anti-ASNase torna difícil o tratamento. Duas cisteíno proteases lisossomais estão relacionadas com a degradação de Ec_ASNase na corrente sanguínea: a Catepsina B (CTSB) e asparaginil endopeptidase (AEP). Em estudos anteriores em nosso laboratório, obtivemos três mutantes de Ec_ASNase resistentes à degradação por AEP e / ou CTSB. Em outra frente, obtivemos enzimas asparaginases de E. coli e D. chrysanthemi expressas em Pichia pastoris, resultando em proteoformas glicosiladas. Todas essas proteínas recombinantes foram resultado do projeto temático FAPESP 2013/08617-7 (autorização CIBio anexa), bem como do Auxilio Regular FAPESP 2015/07749-2. Neste trabalho, propomos avaliar o perfil de citotoxicidade dessas proteoformas, por tiazolil azul tetrazólio (MTT) e ensaios in vivo (autorização CEUA - FCF 560 em anexo) em camundongos Balb/C para avaliação da formação de anticorpos e meia vida das proteoformas em comparação com as enzimas selvagens expressas em bactéria E. coli (sistema convencional de obtenção de L_ASNases). (AU)

Publicações científicas

(12)

(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)

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