Melatonina e seus receptores MT1 e MT2: efeitos na apoptose, proliferação e potencial migratório de células de carcinoma ovariano (linhagem SKOV-3)

• Processo: 19/00906-6
• Modalidade de apoio: Auxílio à Pesquisa - Regular
• Data de Início da vigência: 01 de abril de 2019
• Data de Término da vigência: 30 de setembro de 2021
• Área do conhecimento: Ciências Biológicas - Morfologia - Anatomia
• Pesquisador responsável: Luiz Gustavo de Almeida Chuffa
• Beneficiário: Luiz Gustavo de Almeida Chuffa
• Instituição Sede: Instituto de Biociências (IBB). Universidade Estadual Paulista (UNESP). Campus de Botucatu. Botucatu , SP, Brasil
• Pesquisadores associados: Graziela Gorete Romagnoli ; Lucilene Delazari dos Santos ; Ramon Kaneno ; Robson Francisco Carvalho
• Assunto(s): Metabolismo Movimento celular Neoplasias ovarianas Apoptose Mitocôndrias Proliferação celular Transformação celular neoplásica
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: apoptose | Câncer de ovário | Melatonina e receptores MT1 e MT2 | metabolismo | migração celular | Mitocôndria | Proliferação celular | Carcinogênese experimental

Resumo

O câncer de ovário (CO) é a malignidade mais comum no sistema genital feminino e representa a quinta causa de morte por câncer devido a sua progressão rápida e resistência aos tratamentos associado com baixo prognóstico. A melatonina (Mel), um neurohormônio secretado pela glândula pineal na fase de escuro, tem mostrado propriedades antitumorais em ensaios in vitro e in vivo. Evidências sugerem que a Mel, quando ligada aos seus receptores de membrana MT1 e MT2, possui um efeito oncostático em vários tipos de cânceres, incluindo o CO. A Mel parece ter uma relação especial com a mitocôndria, organela responsável pela sua síntese, pelo metabolismo energético, morte e diferenciação celular, entre outros. Portanto, o objetivo do presente estudo é avaliar a influência da terapia com melatonina sobre a via de sinalização endógena mitocondrial e a apoptose das células de carcinoma ovariano humano (SKOV-3). E ainda, verificar se os efeitos biológicos resultantes da terapia são dependentes da ativação dos receptores MT1/2 através do silenciamento de RNAs (siRNAs). Para tanto, o trabalho será composto pelos grupos experimentais: Grupo Controle e Grupo exposto a Mel (800, 1600 e 2400 µM); os grupos serão subdivididos quanto a presença dos receptores MT1/2 (grupos MT1/2+ tratados ou não com melatonina), ou ausência pelo silenciamento através do uso de siRNA (grupos MT1/2- tratados ou não com melatonina). Será realizado o teste de citotoxicidade celular através do ensaio de MTT, migração e invasão celular por insertos transwell, além do perfil geral de proteínas de adesão via ensaio multiplex. As análises do potencial de membrana mitocondrial, taxa de apoptose (AnexinaV) e ciclo celular serão realizadas por citometria de fluxo. Ainda será investigado a apoptose através da quantificação de proteínas Bcl-2, BAX, citocromo-c e caspase-3 ativa por Western Blotting. Em paralelo, serão mensurados os níveis de melatonina, lactato e glicose, e as mitocôndrias serão isoladas para análise da melatonina endógena e das enzimas envolvidas com a sua produção (AA-NAT e ASMT). Com auxílio da estratégia proteômica global por electrospray (LC/MS-MS), as proteinas e peptídeos serão quantificados e estudados. Os achados no presente estudo poderão contribuir para a discussão atual sobre o papel da melatonina no metabolismo alterado das células neoplásicas do CO. (AU)

Publicações científicas

(13)

(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)

LUPI, LUIZ ANTONIO; DELELLA, FLAVIA KARINA; CUCIELO, MAIRA SMANIOTTO; ROMAGNOLI, GRAZIELA GORETE; KANENO, RAMON; NUNES, ISEU DA SILVA; DOMENICONI, RAQUEL FANTIN; MARTINEZ, MARCELO; MARTINEZ, FRANCISCO EDUARDO; FAVARO, WAGNER JOSA; et al. P-MAPA and Interleukin-12 Reduce Cell Migration/Invasion and Attenuate the Toll-Like Receptor-Mediated Inflammatory Response in Ovarian Cancer SKOV-3 Cells: A Preliminary Study. Molecules, v. 25, n. 1, JAN 2020. (16/03993-9, 19/00906-6)

DE ALMEIDA CHUFFA, LUIZ GUSTAVO; LUPI, LUIZ ANTONIO; CUCIELO, MAIRA SMANIOTTO; SILVEIRA, HENRIQUE SPAULONCI; REITER, RUSSEL J.; FERREIRA SEIVA, FABIO RODRIGUES. Melatonin Promotes Uterine and Placental Health: Potential Molecular Mechanisms. INTERNATIONAL JOURNAL OF MOLECULAR SCIENCES, v. 21, n. 1, JAN 1 2020. (19/00906-6)

LUPI, LUIZ ANTONIO; CUCIELO, MAIRA SMANIOTTO; SILVEIRA, HENRIQUE SPAULONCI; GAIOTTE, LETICIA BARBOSA; CESARIO, ROBERTA CARVALHO; FERREIRA SEIVA, FABIO RODRIGUES; DE ALMEIDA CHUFFA, LUIZ GUSTAVO. The role of Toll-like receptor 4 signaling pathway in ovarian, cervical, and endometrial cancers. Life Sciences, v. 247, APR 15 2020. (19/00906-6)

DE MORAIS OLIVEIRA, DIEGO AUGUSTO; LUPI, LUIZ ANTONIO; SILVEIRA, HENRIQUE SPAULONCI; DE ALMEIDA CHUFFA, LUIZ GUSTAVO. Protein restriction during puberty alters nutritional parameters and affects ovarian and uterine histomorphometry in adulthood in rats. International Journal of Experimental Pathology, MAR 2021. (19/00906-6, 18/09243-7)

SILVEIRA, HENRIQUE SPAULONCI; LUPI, LUIZ ANTONIO; ROMAGNOLI, GRAZIELA GORETE; KANENO, RAMON; NUNES, ISEU DA SILVA; FAVARO, WAGNER JOSE; DE ALMEIDA CHUFFA, LUIZ GUSTAVO. P-MAPA activates TLR2 and TLR4 signaling while its combination with IL-12 stimulates CD4+and CD8+effector T cells in ovarian cancer. Life Sciences, v. 254, AUG 1 2020. (17/03441-9, 16/03993-9, 19/00906-6)

DE MORAIS OLIVEIRA, DIEGO AUGUSTO; LUPI, LUIZ ANTONIO; SILVEIRA, HENRIQUE SPAULONCI; DE ALMEIDA CHUFFA, LUIZ GUSTAVO. Protein restriction during puberty alters nutritional parameters and affects ovarian and uterine histomorphometry in adulthood in rats. International Journal of Experimental Pathology, v. 102, n. 2, p. 93-104, APR 2021. (18/09243-7, 19/00906-6)

CHUFFA, L. G.; CUCIELO, M.; CARVALHO, R. F.; ROMAGNOLI, G. G.; KANENO, R.; SEIVA, F.. Melatonin reverses the Warburg-dependent effect in ovarian cancer cell by binding to the MT1 and MT2 receptors. Annals of Oncology, v. 31, p. 2-pg., 2020-09-01. (19/00906-6, 18/15797-5)

CHUFFA, LUIZ GUSTAVO DE ALMEIDA; CARVALHO, ROBSON FRANCISCO; JUSTULIN, LUIS ANTONIO; CURY, SARAH SANTILONI; SEIVA, FABIO RODRIGUES FERREIRA; JARDIM-PERASSI, BRUNA VICTORASSO; ZUCCARI, DEBORA APARECIDA PIRES DE CAMPOS; REITER, RUSSEL J.. A meta-analysis of microRNA networks regulated by melatonin in cancer: Portrait of potential candidates for breast cancer treatment. Journal of Pineal Research, v. 69, n. 4, NOV 2020. (19/00906-6)

DE ALMEIDA CHUFFA, LUIZ GUSTAVO; FERREIRA SEIVA, FABIO RODRIGUES; NOVAIS, ADRIANA ALONSO; SIMAO, VINICIUS AUGUSTO; MARTIN GIMENEZ, VIRNA MARGARITA; MANUCHA, WALTER; PIRES DE CAMPOS ZUCCARI, DEBORA APARECIDA; REITER, RUSSEL J.. Melatonin-Loaded Nanocarriers: New Horizons for Therapeutic Applications. Molecules, v. 26, n. 12, JUN 2021. (19/00906-6)

LUPI JUNIOR, LUIZ ANTONIO; CUCIELO, MAIRA SMANIOTTO; DOMENICONI, RAQUEL FANTIN; DOS SANTOS, LUCILENE DELAZARI; SILVEIRA, HENRIQUE SPAULONCI; NUNES, ISEU DA SILVA; MARTINEZ, MARCELO; MARTINEZ, FRANCISCO EDUARDO; FAVARO, WAGNER JOSE; DE ALMEIDA CHUFFA, LUIZ GUSTAVO. P-MAPA and IL-12 Differentially Regulate Proteins Associated with Ovarian Cancer Progression: A Proteomic Study. ACS OMEGA, v. 4, n. 26, p. 21761-21777, DEC 24 2019. (16/03993-9, 19/00906-6)

CESARIO, ROBERTA CARVALHO; GAIOTTE, LETICIA BARBOSA; CUCIELO, MAIRA SMANIOTTO; SILVEIRA, HENRIQUE SPAULONCI; DOS SANTOS, LUCILENE DELAZARI; PIRES DE CAMPOS ZUCCARI, DEBORA APARECIDA; FERREIRA SEIVA, FABIO RODRIGUES; REITER, RUSSEL J.; DE ALMEIDA CHUFFA, LUIZ GUSTAVO. The proteomic landscape of ovarian cancer cells in response to melatonin. Life Sciences, v. 294, p. 14-pg., 2022-04-01. (19/00906-6)

DE ALMEIDA CHUFFA, LUIZ GUSTAVO; FREIRE, PAULA PACCIELLI; SOUZA, JEFERSON DOS SANTOS; DE MELLO, MARIANA COSTA; NETO, MARIO DE OLIVEIRA; CARVALHO, ROBSON FRANCISCO. ging whole blood transcriptome reveals candidate genes for SARS-CoV-2-related vascular and immune alteration. JOURNAL OF MOLECULAR MEDICINE-JMM, v. 100, n. 2, NOV 2021. (19/00906-6)

CUCIELO, MAIRA SMANIOTTO; CESARIO, ROBERTA CARVALHO; SILVEIRA, HENRIQUE SPAULONCI; GAIOTTE, LETICIA BARBOSA; ALCANTARA DOS SANTOS, SERGIO ALEXANDRE; DE CAMPOS ZUCCARI, DEBORA APARECIDA PIRES; FERREIRA SEIVA, FABIO RODRIGUES; REITER, RUSSEL J.; CHUFFA, LUIZ GUSTAVO DE ALMEIDA. Melatonin Reverses the Warburg-Type Metabolism and Reduces Mitochondrial Membrane Potential of Ovarian Cancer Cells Independent of MT1 Receptor Activation. Molecules, v. 27, n. 14, p. 15-pg., 2022-07-01. (19/00906-6, 18/15797-5)