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Digestão e absorção intestinal em 3 insetos: um enfoque enzimológico, transcriptomico e proteomico

Processo: 19/21065-0
Modalidade de apoio:Auxílio à Pesquisa - Pesquisador Visitante - Brasil
Vigência: 17 de fevereiro de 2020 - 16 de fevereiro de 2021
Área do conhecimento:Ciências Biológicas - Bioquímica
Pesquisador responsável:Walter Ribeiro Terra
Beneficiário:Walter Ribeiro Terra
Pesquisador visitante: Carlos Peres Silva
Inst. do pesquisador visitante: Universidade Federal de Santa Catarina (UFSC). Centro de Ciências Biológicas, Brasil
Instituição Sede: Instituto de Química (IQ). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
Vinculado ao auxílio:17/08103-4 - A digestão nos insetos: uma abordagem molecular, celular, fisiológica e evolutiva, AP.TEM
Assunto(s):Enzimas digestivas  Transcriptômica  Digestão  Insetos  Absorção  Proteômica 
Palavra(s)-Chave do Pesquisador:Absorção | digestão | Enzimas digestivas | insetos | proteômica | Transcriptômica | Fisiologia molecular intestinal de insetos

Resumo

Resumo do projeto de pesquisador visitante por um anoConvidado: Dr. Carlos Peres Silva, UFSCProjeto: "Digestão e absorção intestinal em 3 insetos. Um enfoque enzimológico, transcriptomico e proteomico pelo período de um ano".Esse projeto insere-se nos temas inclusos no Projeto Temático FAPESP (Processo: 2017/08103-4), coordenado pelo Dr. Walter R. Terra, referentes a busca por modelos que descrevam os processos moleculares subjacentes aos processos digestivos e absortivos de nutrientes em insetos dispostos em pontos relevantes da série evolutiva dos insetos. A proposta específica relativa a esse convite envolve a identificação dos genes codificantes das principais enzimas digestivas reportadas de Zabrotes subfasciatus (Silva et. Insect Biochem. Mol. Biol. (1999) 29:355-366) e Dermestes maculatus (Caldeira et al., Arch.Insect Biochem. Physiol. (2007) 64:1-18), assim como dos principais transportadores de nutrientes e íons envolvidos na absorção intestinal desses insetos. Os procedimentos a serem utilizados em relação às enzimas digestivas serão os mesmos que utilizamos para Periplaneta americana (Tamaki et al. J. Insect Physiol. (2014) 70:22-35) e aqueles referentes a transportadores, como os que empregamos em Tenebrio molitor (Moreira et al., (2017) 99: 58-66) e Musca domestica (Pimentel et al. (2018) J. Insect Physiol.109: 11-20; Barroso et al. (2019) Comp.Biochem. Physiol. Part A 337,110535). Os testes funcionais dos modelos a serem propostos serão inspirados nos realizados com Musca domestica.Outra vertente do projeto é a identificação por proteomica dos transportadores presentes nas membranas microvilares e perimicrovilares intestinais de Rhodnius prolixus (Terra eta., Insect Biochem (1988) 18: 423-434; Ferreira et al., Insect Biochem. (1988) 18: 521-530). As membranas perimicrovilares são membranas que revestem como dedos de luvas as membranas microvilares intestinais dos hemípteros como R. prolixus. A grande dificuldade aqui é o isolamento em massa das membranas microvilares e perimicrovilares desse inseto para a análise proteomica.O laboratório já dispõe dos transcriptomas em triplicata de várias regiões intestinais dos 3 insetos a serem estudados e técnica especialista na parte bioinformática de apoio ao processo. A preparação das membranas microvilares e perimicrovilares terá o apoio da equipe do Dr. Fernando A. Genta da FIOCRUZ-RJ e do Dr. Ignacio G. barroso de nosso laboratório. A proteomica será analisada nas instalações do IQ-USP.O cronograma a ser seguido é o seguinte:1. Busca de transportadores de íons e de nutrientes e enzimas digestivas em Zabrotes subfasciatus e Dermestes maculatus.2. Análise de expressão dos transportadores e enzimas ao longo do intestino dos dois insetos. 3. Produção de modelos de funcionamento ao nível molecular dos intestinos dos dois insetos mencionados e testes funcionais correspondentes.4. Proteomica das membranas microvilares e preimicrovilares de Rhodnius prolixus e proposição de modelos de sua participação na fisiologia intestinal.A participação do Dr. Carlos P. Silva será de grande valia no desenvolvimento desse projeto, já que tem experiência em biologia de Z. subfasciatus (Silva et. Insect Biochem. Mol. Biol. (1999) 29:355-366), que é crítica nesse projeto e que o auxiliará com D. maculatus, assim como habilidade comprovada em isolar membranas perimicrovilares e microvilares intestinais de hemípteros. (Silva et al. Insect Biochem. Mol. Biol. (1996) 26: 1011-1018). (AU)

Matéria(s) publicada(s) na Agência FAPESP sobre o auxílio:
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