Efeitos do 17b-estradiol e da metformina na captação de glicose, ativação das vias de sinalização de FOXO3a e do receptor de insulina em células ovarianas in vitro e ex vivo

• Processo: 18/26800-7
• Modalidade de apoio: Auxílio à Pesquisa - Regular
• Data de Início da vigência: 01 de julho de 2020
• Data de Término da vigência: 30 de junho de 2022
• Área do conhecimento: Ciências da Saúde - Medicina - Saúde Materno-infantil
• Pesquisador responsável: Edmund Chada Baracat
• Beneficiário: Edmund Chada Baracat
• Instituição Sede: Faculdade de Medicina (FM). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
• Pesquisadores associados: Kátia Cândido Carvalho ; Luciana Lamarão Damous
• Assunto(s): Ginecologia Resistência à insulina Receptor de insulina Metformina Estradiol Proteínas de ligação a DNA Ovário
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Foxo3a | Metformina | ovários | receptores de insulina | resistência a insulina | 17 ²-estradiol | Ginecologia

Resumo

Os estrogênios respondem por inúmeros processos biológicos. Nos ovários, sua produção e secreção contribuem significativamente para a manutenção da fisiologia feminina. O 17 ²-estradiol (E2) é a forma mais ativa de estrogênio natural. Para desempenhar sua função depende da ativação de seu receptor (ER± ou ²). Além disso, controla a via de sinalização PI3K/AKT por aumento de sua interação com o ER±, estimulando o metabolismo da glicose. O potencial antidiabetogênico do E2 pode ter importância clínica no tratamento da Resistência Insulínica (RI), comumente observada na Síndrome dos Ovários Policísticos (SOP). Embora tenha ocorrido um grande avanço na compreensão e caracterização da alteração energética na RI, o número de fármacos utilizados no tratamento das morbidades relacionadas a ela, ainda é muito limitado. O tratamento da RI por meio de agentes sensibilizadores de insulina, como a metformina, ainda é controverso, pois alguns pesquisadores defendem seu uso apenas em pacientes com intolerância à glicose. Adicionalmente, como já mencionado, o E2 controla a via PI3K/AKT que, em resposta à insulina, induz a fosforilação do fator de transcrição FOXO. Esta, por sua vez, pode ser inibida pela metformina, evitando a translocação da proteína para o citoplasma. Assim, haveria diminuição na expressão de seus genes alvo, que poderia induzir a RI. Nosso projeto tem como objetivo verificar os efeitos do tratamento com 17²-estradiol e metformina, isolados e combinados, na captação de glicose e seu papel nas vias de sinalização do FOXO3a e do receptor de insulina (InsR) em células ovarianas in vitro e ex vivo. Para isso, serão realizadas culturas de células CHO 1-15 (ATCC CRL9606) e de células primárias. As células serão tratadas com com baixa e alta concentração de glicose (LowGlic = 1.000 mg/L e HighGlic = 1.800 mg/L, respectivamente) e subdivididas em 8 grupos: 1) Controle (sem tratamento); 2) 17²-estradiol; 3) metformina; 4) insulina, 5) 17²-estradiol e metformina; 6) 17²-estradiol e insulina; 7) metformina e insulina, e 8) 17²-estradiol, metformina e insulina. A captação de glicose será avaliada por espectrofotometria e a expressão de moléculas relacionadas às vias de sinalização do FOXO3a e do InsR serão avaliadas por PCR em Tempo Real e por Western Blot. Já os efeitos dos tratamentos no comportamento das células serão avaliados por meio de ensaios de proliferação e de apoptose. Todos os resultados serão submetidos às análises estatísticas pertinentes. (AU)