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Caracterização molecular de exossomos na linhagem celular TT de carcinoma medular de tireoide

Resumo

O carcinoma medular de tireoide (CMT) é um tipo relativamente raro de tumores da glândula, e compreende cerca de 5% dos casos, porém é responsável por 13% da mortalidade total. Até o presente, não existe na literatura informação sobre se células de CMT secretam ou não exossomos ou miRNA, embora diversos tipos de neoplasias tenham sido bem caracterizados neste aspecto, revelando um papel importante da secreção de exossomos em mediar os mecanismos de tumorigênise. Este trabalho objetiva investigar se ocorre secreção de exossomos por células de linhagens de CMT e caracterizar o conteúdo dos exossomos. Para a purificação dos exossomos, usaremos centrifugação em polímero comercialmente disponível (Exo-spin), próprio para separação por densidade e tamanho, um método amplamente aceito. Uma vez purificados os exossomos, sua caracterização morfológica será por microscopia eletrônica e nanoparticle tracking analysis. Exossomos purificados e validados desta forma serão ainda caracterizados quanto a seu conteúdo de miRNA, pela tecnologia Nanostring nCounter, e estes dados serão usados para predição de vias alvos dos miRNAs secretados, usando as ferramentas online miRWalk e PANTHER. Esperamos usar estes resultados para predizer interações entre o CMT e outras células no microambiente tumoral, servindo como suporte para futuros estudos experimentais. (AU)

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