Papel do inflamassoma NLRP3 na dinâmica de desenvolvimento da lesão periapical em animais wild-type e knockout

• Processo: 20/04862-0
• Modalidade de apoio: Auxílio à Pesquisa - Regular
• Data de Início da vigência: 01 de setembro de 2020
• Data de Término da vigência: 31 de agosto de 2022
• Área do conhecimento: Ciências da Saúde - Odontologia - Odontopediatria
• Pesquisador responsável: Léa Assed Bezerra da Silva
• Beneficiário: Léa Assed Bezerra da Silva
• Instituição Sede: Faculdade de Odontologia de Ribeirão Preto (FORP). Universidade de São Paulo (USP). Ribeirão Preto , SP, Brasil
• Município da Instituição Sede: Ribeirão Preto
• Pesquisadores associados: Carolina Maschietto Pucinelli ; Raquel Assed Bezerra da Silva
• Assunto(s): Lesões periapicais Inflamassomos Proteína 3 que contém domínio de pirina da família NLR Modelos animais
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: inflamassoma | Lesão Periapical | Nlrp3 | Odontopediatria

Resumo

Os inflamassomas são estruturas multiproteicas que tem como principal objetivo desencadear a ativação da caspase-1 e, consequentemente, clivar interleucinas como a IL-1² e a IL-18. Os inflamassomas têm sido estudados como alvo terapêutico de diversas doenças sistêmicas. A manipulação de componentes dos inflamassomas pode alterar e favorecer a resolução de determinadas doenças. Assim, o objetivo geral desse estudo será avaliar o papel do inflamassoma NLRP3 na dinâmica de desenvolvimento da lesão periapical (LP) induzida em dentes de camundongos. Para esse objetivo, o presente estudo será dividido em 2 etapas. Na Etapa 1, o objetivo específico será avaliar a participação do NLRP3 na formação e desenvolvimento da lesão periapical induzida em animais wild-type (com e sem medicação inibidora específica de NLRP3) e knockout (NLRP3-/-). Para a Etapa 1 serão realizadas: análise microscópica (HE para descrição do processo inflamatório e imunohistoquímica para macrófagos, neutrófilos, IL-1², IL-18 e Caspase-1); microtomografia computorizada (¼-CT) para mensuração das LPs; qRT-PCR para expressão gênica de IL-1², IL-18, NLRP3 e Caspase-1; e TRAP para a quantificação de osteoclastos. Já na Etapa 2 serão avaliadas a piroptose e a liberação de microvesículas, como padrão de expressão da IL-1², ao longo do desenvolvimento da LP induzida em animais NLRP3-/- e WT, por meio da realização de qRT-PCR para quantificação de GSDM-D e P2X7, respectivamente. Os dados serão analisados por meio do programa estatístico Graph Pad Prism 7, utilizando os testes adequados para cada uma das avaliações (±=5%). (AU)