Avançando no entendimento da patogenicidade e virulência da Leptospira interrogans através de análises proteômicas, estruturais, mutagênicas e imunológicas

• Processo: 19/17488-2
• Linha de fomento: Auxílio à Pesquisa - Temático
• Vigência: 01 de dezembro de 2020 - 30 de novembro de 2025
• Área do conhecimento: Ciências Biológicas - Microbiologia - Microbiologia Aplicada
• Pesquisador responsável: Ana Lucia Tabet Oller do Nascimento
• Beneficiário: Ana Lucia Tabet Oller do Nascimento
• Instituição-sede: Instituto Butantan. Secretaria da Saúde (São Paulo - Estado). São Paulo , SP, Brasil
• Pesquisadores principais: Daniel Carvalho Pimenta
• Pesq. associados: Alexandre Paulo Yague Lopes ; Aline Rodrigues Florêncio Teixeira ; Eliete Caló Romero ; Giovana Cappio Barazzone ; Gisele Oliveira de Souza ; Jademilson Celestino dos Santos ; Luis Guilherme Virgílio Fernandes ; Marcos Bryan Heinemann ; Mônica Larucci Vieira ; Silvio Arruda Vasconcellos
• Bolsa(s) vinculada(s): 17/06731-8 - Aplicação de CRISPR-interferência na elucidação da patogênese da leptospirose e desenvolvimento de novas estratégias para obtenção de mutantes knockout, BP.PD; 16/11541-0 - Avaliação do potencial vacinal de frações antigênicas obtidas em Leptospira interrogans serovar Copenhageni utilizando hamster como modelo animal, BP.PD
• Assunto(s): Bioquímica Análise estrutural Proteômica Mutagênese Virulência Leptospirose Leptospira

Resumo

A leptospirose é uma zoonose distribuída em praticamente todos os continentes, com um índice altamente prevalente nas regiões tropicais e subtropicais. Causada pela bactéria patogênica do gênero Leptospira, a leptospirose em humanos em países desenvolvidos tem uma baixa incidência e está em sua maioria ligada com atividades ocupacionais ou recreativas associadas com água. Já nos países em desenvolvimento, estima-se que a cada ano mais de 1 milhão de casos de leptospirose sejam reportados em humanos com aproximadamente 60 mil mortes anuais. Em todos os países, a leptospirose causa grande impacto econômico na agroindústria, uma vez que a doença pode afetar o gado, causando diminuição na produção de leite, problemas no desenvolvimento e morte precoce. Nas áreas urbanas, os roedores como Rattus norvegicus são os principais reservatórios da leptospirose. Os ratos são carreadores assintomáticos das doença, excretando as bactérias vivas durante a sua existência, contaminando água e solo. No Brasil, as epidemias mais frequentes ocorrem no período de chuvas, época em que os alagamentos constantes associados às condições precárias de saneamento favorecem o contato com ambiente e água contaminada. Os sintomas associados à doença podem incluir febre, calafrios, dores de cabeça e mialgia, podendo evoluir para formas mais severas, por exemplo, síndrome de Weil e a síndrome hemorrágica pulmonar severa (SPHS - Severe Pulmonary Hemorrhagic Syndrome) que são responsáveis por cerca de 10% a 50% dos casos de mortalidade por leptospirose em adultos. Ainda não existe um eficiente método diagnóstico precoce, por isso o desenvolvimento de uma vacina é extremamente importante. Medidas para controlar a propagação da doença são difíceis de implementar e a melhor opção é a adoção de medidas profiláticas. O entendimento dos mecanismos de patogenicidade das leptospiras, bem como a identificação de fatores de virulência, são fundamentais para bloquear a ação deste patógeno. Nesse sentido, o presente projeto propõe utilizar diferentes ferramentas metodológicas e avançar no entendimento desta bactéria em diferentes aspectos: análises proteômicas comparativas, bioquímica estrutural das proteinas recombinantes, mutantes knock-in de cepas saprófitas e silenciamento de genes em cepas patogênicas por CRISPR Cas9, processo de purificação de proteinas recombinants em escala de 10 litros para o desenvolvimento de kit diagnóstico, e avaliar o envolvimento das proteínas recombinantes de leptospiras, LipL41, LipL21, Lip46 e OmpL37 como receptores de células endoteliais e epiteliais in vitro. (AU)

Publicações científicas

(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)

TAKAHASHI, M. B.; TEIXEIRA, A. F.; ALTO, NASCIMENTO. The leptospiral LipL21 and LipL41 proteins exhibit a broad spectrum of interactions with host cell components. VIRULENCE, v. 12, n. 1, p. 2798-2813, DEC 31 2021. (17/26223-7, 19/17488-2, 17/00236-5)

PASSALIA, FELIPE JOSE; HEINEMANN, MARCOS BRYAN; VIEIRA, MONICA LARUCCI; NASCIMENTO, ANA LUCIA T. O.. A Novel Leptospira interrogans Protein LIC13086 Inhibits Fibrin Clot Formation and Interacts With Host Components. FRONTIERS IN CELLULAR AND INFECTION MICROBIOLOGY, v. 11, JUL 1 2021. (17/01102-2, 18/07054-2, 17/00236-5, 14/50981-0, 19/17488-2)

FERNANDES, LUIS G. V.; PUTZ, ELLIE J.; STASKO, JUDITH; LIPPOLIS, JOHN D.; NASCIMENTO, ANA L. T. O.; NALLY, JARLATH E.. valuation of LipL32 and LigA/LigB Knockdown Mutants in Leptospira interrogans Serovar Copenhageni: Impacts to Proteome and Virulenc. FRONTIERS IN MICROBIOLOGY, v. 12, FEB 2 2022. (17/06731-8, 19/20302-8, 19/17488-2)