Aspectos imunomodulatórios na progressão e tratamento da leucoplasia oral: estudos in vitro e in vivo

• Processo: 20/07375-3
• Modalidade de apoio: Auxílio à Pesquisa - Regular
• Data de Início da vigência: 01 de setembro de 2021
• Data de Término da vigência: 31 de agosto de 2023
• Área do conhecimento: Ciências da Saúde - Odontologia
• Pesquisador responsável: Estela Kaminagakura Tango
• Beneficiário: Estela Kaminagakura Tango
• Instituição Sede: Instituto de Ciência e Tecnologia (ICT). Universidade Estadual Paulista (UNESP). Campus de São José dos Campos. São José dos Campos , SP, Brasil
• Pesquisadores associados: Mário José Romañach Gonzalez Sobrinho ; Nadarajah Vigneswaran ; Román Carlos
• Assunto(s): Neoplasias de cabeça e pescoço Carcinoma de células escamosas Leucoplasia bucal Artemisininas Rubus occidentalis Morte celular imunogênica Expressão de proteínas Citocinas
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: antocianina | Artemisina | célula imune | Célula T | Morte celular imunogênica | Estomatologia

Resumo

O carcinoma espinocelular (CEC) na região de cabeça e pescoço é uma das neoplasias malignas mais frequentes no mundo. Uma das formas da sua prevenção é detecção precoce e tratamento das lesões potencialmente malignas orais (LPM). Uma das LPMO mais comuns é a leucoplasia oral (LPO) sua taxa transformação maligna está relacionada a sua forma clínica e à presença ou não de displasia epitelial. Até o presente momento, não há evidências de que qualquer tratamento para LPO reduza a progressão para o câncer bucal. Os objetivos deste estudo serão: avaliar se os tratamentos com artemisinin e/ou com Rubus occidentalis extract (BRB) são capazes de induzir a morte celular imunogênica (Immunogenic Cell Dead) nas linhagens celulares humanas de LPO e em modelo pré-clínico; caracterizar a população de células inflamatórias; verificar a expressão gênica de citocinas inflamatórias e da morte celular imunogênica. Material e métodos: no estudo in vitro, linhagens celulares comerciais de LPO serão tratadas por artemisina e BRB de forma combinada ou isolada a fim de analisarmos a expressão da proteína Box de alta mobilidade (HGMB) intracelular, caspase 3, 8 e 9 e, Calreticulin (CALR) por imunofluorescência. A HGMB extracelular será verificada por meio do teste ELISA. No ensaio in vivo, 72 camundongos machos receberão água com 4-Nitroquinoline N-oxide por 16 semanas. Na 8ª semana, após a detecção das LPOs, os animais serão tratados com injeção subepitelial de artemisina semanalmente e/ou por BRB na alimentação diária. Nas 12ª e 16ª semanas, os animais serão eutanasiados, as línguas coletadas serão analisadas clinicamente e fotografadas. A reação de qRT-PCR será realizada para avaliar os transcritos das citocinas inflamatórias e das MCIs. Posteriormente, a outra metade da língua será empregada para avaliação da expressão proteica de citocinas inflamatórias e das MCIs por meio do teste ELISA. A classificação do grau de displasia epitelial será realizada em microscopia de luz convencional e a caracterização e quantificação da população das células imunes será feita pela técnica de imuno-histoquímica. Os testes estatísticos apropriados serão empregados com ±=0.05. (AU)