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Fatores de transcrição bacterianos envolvidos em homeostase de metais, estresse oxidativo e virulência: investigando como Chromobacterium violaceum muda do ambiente para o hospedeiro

Processo: 21/06894-0
Modalidade de apoio:Auxílio à Pesquisa - Jovens Pesquisadores - Fase 2
Vigência: 01 de julho de 2022 - 30 de junho de 2027
Área do conhecimento:Ciências Biológicas - Genética - Genética Molecular e de Microorganismos
Pesquisador responsável:José Freire da Silva Neto
Beneficiário:José Freire da Silva Neto
Instituição Sede: Faculdade de Medicina de Ribeirão Preto (FMRP). Universidade de São Paulo (USP). Ribeirão Preto , SP, Brasil
Pesquisadores associados: Eric Skaar ; Luis Eduardo Soares Netto ; Tie Koide
Vinculado ao auxílio:12/20435-9 - Fatores de transcrição de Chromobacterium violaceum: integrando vias de sinalização, regulons e patogenicidade, AP.JP
Bolsa(s) vinculada(s):23/09116-3 - Resposta global de Chromobacterium violaceum à limitação de metais mediada pela proteína de defesa do hospedeiro calprotectina, BP.PD
23/03796-2 - Mecanismos de regulação e transporte de manganês e sua relação com a virulência de Chromobacterium violaceum, BP.PD
23/02296-6 - Técnicas de biologia molecular e microbiologia como apoio ao estudo de genes envolvidos na homeostase de metais e virulência em Chromobacterium violaceum, BP.TT
+ mais bolsas vinculadas 23/02350-0 - Manutenção de larvas de Galleria mellonella para ensaios de virulência com Chromobacterium violaceum, BP.TT
22/12782-2 - Determinação do regulon Zur em Chromobacterium violaceum, BP.MS
22/05485-1 - Caracterização de vias regulatórias e adesinas envolvidas na formação de biofilme e patogenicidade de Chromobacterium violaceum, BP.DR
20/15268-2 - Mecanismos de homeostase de heme em Chromobacterium violaceum, BP.DR
22/05740-1 - Papel de uma ATPase do tipo P em efluxo de metal em Chromobacterium violaceum, BP.IC
22/07859-6 - Técnicas de biologia molecular e microbiologia como apoio ao estudo de genes envolvidos na homeostase de metais e virulência em Chromobacterium violaceum, BP.TT - menos bolsas vinculadas
Assunto(s):Genética molecular  Chromobacterium violaceum  Fatores de transcrição  Virulência  Homeostase  Imunidade 
Palavra(s)-Chave do Pesquisador:Bacterial antioxidant defense | Bacterial transcription factors | Bacterial virulence | Chromobacterium violaceum | Metal homeostasis | Nutritional immunity | Genética Molecular de Bactérias

Resumo

As bactérias possuem mecanismos sofisticados para sobreviver em ambientes hostis. Os patógenos bacterianos devem lidar com condições severas de estresse dentro do hospedeiro, como estresse oxidativo e limitação dos metais essenciais ferro, zinco e manganês. Este projeto visa desvendar como o patógeno oportunista ambiental Chromobacterium violaceum coordena as respostas adaptativas da homeostase de metais e defesa antioxidante com a expressão de fatores de virulência para sobreviver no hospedeiro. Construiremos uma biblioteca de mutantes por inserção de transposon em C. violaceum e um modelo alternativo de infecção usando Galleria mellonella. A biblioteca será rastreada em G. mellonella para descobrir novos fatores de virulência de C. violaceum e em placas CAS para identificar novos fatores de transcrição envolvidos em redes regulatórias de sideróforos. O sequenciamento de RNA (RNA-seq) será utilizado para identificar as respostas de C. violaceum à infecção intracelular, à limitação de metal mediada pela proteína de defesa do hospedeiro calprotectina e à intoxicação por heme e manganês. Os regulons de vários fatores de transcrição de C. violaceum envolvidos com a homeostase de metal, estresse oxidativo e virulência serão determinados por RNA-seq e ChIP-seq. As linhagens mutantes nulas serão utilizadas para caracterizar (I) o papel de transportadores para a captação ou efluxo de ferro, heme, zinco e manganês; (II) o papel da glutationa e do sistema GarAB na defesa contra metal e estresse oxidativo; (III) o papel do sistema de secreção do tipo VI (T6SS) na captação de metais; (IV) o papel de fatores de transcrição na formação de biofilme e resistência a antibióticos. Os dados obtidos neste projeto deverão revelar estratégias bacterianas para superar a imunidade nutricional do hospedeiro. (AU)

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Publicações científicas
(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)
ALVES, JULIA A.; LEAL, FERNANDA C.; PREVIATO-MELLO, MARISTELA; DA SILVA NETO, JOSE F.. A Quorum Sensing-Regulated Type VI Secretion System Containing Multiple Nonredundant VgrG Proteins Is Required for Interbacterial Competition in Chromobacterium violaceum. MICROBIOLOGY SPECTRUM, v. N/A, p. 15-pg., . (18/03979-1, 18/12461-6, 20/00259-8, 21/06894-0)

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