Estudo da modulação da expressão de Ezh2 e de outros modificadores de H3K27 por fatores da transcrição NF-kB em células adiposas

• Processo: 19/13618-9
• Modalidade de apoio: Auxílio à Pesquisa - Regular
• Data de Início da vigência: 01 de abril de 2022
• Data de Término da vigência: 30 de setembro de 2024
• Área do conhecimento: Ciências Biológicas - Bioquímica - Biologia Molecular
• Pesquisador responsável: Maria Isabel Cardoso Alonso-Vale
• Beneficiário: Maria Isabel Cardoso Alonso-Vale
• Instituição Sede: Instituto de Ciências Ambientais, Químicas e Farmacêuticas (ICAQF). Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP). Campus Diadema. Diadema , SP, Brasil
• Pesquisadores associados: Cleiton Fagundes Machado ; Daniela Franco Bueno ; João Carlos Cardoso Alonso ; Lúcia Maria Armelin Correa ; Mariana Cifuentes ; Renato Barboza
• Auxílio(s) vinculado(s): 24/03140-2 - 31st European Congress on Obesity - ECO 2024, AR.EXT
• Assunto(s): Epigênese genética Obesidade Adipogenia Histonas NF-kappa B Proteína potenciadora do homólogo 2 de zeste Fatores de transcrição
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: adipogênese | epigenética | Ezh2 | modificadores de histona | NF-kB | obesidade | Epigenética

Resumo

O tecido adiposo apresenta uma alta plasticidade respondendo à diferentes demandas metabólicas do indivíduo. A principal célula responsável por estas respostas é o adipócito maduro, mas células tronco mesenquimais contidas na fração do estroma vascular do tecido adiposo (AdSCs) permitem a sua expansão através da diferenciação em novos adipócitos. Durante a adipogênese alterações epigenéticas envolvendo a lisina 27 da histona 3 (H3K27) são críticas tanto para o silenciamento de genes responsáveis pelo comprometimento das AdSCs com outros destinos celulares, como condrogênese e osteogênese, quanto para a ativação de fatores de transcrição críticos para a adipogênese, como Pparg. Ezh2 é responsável pela trimetilação da lisina 27 da histona 3 (H3K27me3) que leva ao silenciamento gênico, enquanto Crebbp e Ep300 (Cbp/p300) são responsáveis pela acetilação da lisina 27 da histona 3 (H3K27ac) que leva a ativação da transcrição. Entre o silenciamento e a ativação de genes é necessário a ação das demetilases de H3K27, Kdm6a e Kdm6b. Sabe-se que em câncer a expressão de Ezh2 é regulada pela família de fatores de transcrição de NF-kB, mas pouco se sabe sobre a regulação da transcrição de Ezh2 em tecido adiposo. Sítios de ligação para NF-kB também estão presentes na região promotora dos genes Crebbp, Ep300, Kdm6a e Kdmb6b. Em indivíduos obesos ocorre um aumento significativo da TNF-a e endotoxinas circulantes o que leva a ativação de NF-kB no tecido adiposo. A nossa hipótese é que a expressão dos modificadores de histona, Ezh2, Kdm6a, Kdmb6b, Crebbp e Ep300, é modulada por NF-kB em adipócitos, pré-adipócitos e AdSCs. A alteração na expressão desses modificadores de histona pode modificar a expressão de fatores de transcrição chave para a adipogênese e o metabolismo no adipócito, como Klf15. Assim, os objetivos desse trabalho são: 1) investigar se as expressões de Ezh2, Crebbp, Ep300, Kdm6a e Kdmb6b são moduladas por NF-kB em modelo de adipócitos e pré-adipócitos murinos (3T3-L1) e humanos (hWA A41) através de estímulo com TNF-a, LPS e meio condicionado de macrófagos, usando imunoprecipitação de cromatina (ChIP), inibidores enzimáticos e inibição por RNA de interferência (siRNA); 2) investigar se as alterações na expressão desses modificadores de histona afetam a expressão de fatores de transcrição potencialmente regulados por H3K27me3 em pré-adipócitos, como Klf15; 3) investigar se os achados nas linhagens celulares podem ser replicados em amostras de tecido adiposo de pacientes obesos. Esse trabalho trará importante contribuição para o entendimento do efeito da inflamação na expressão de modificadores de histona e na assinatura epigenéticas de fatores de transcrição que atuam na adipogênese e no metabolismo de adipócitos. (AU)

Publicações científicas

(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)

DA SILVA, VIVIANE S.; SIMAO, JUSSARA J.; PLATA, VICTOR; DE SOUSA, ANDRESSA FRANCA; DA CUNHA DE SA, ROBERTA D. C.; MACHADO, CLEITON FAGUNDES; STUMPP, TAIZA; ALONSO-VALE, MARIA ISABEL C.; ARMELIN-CORREA, LUCIA. High-fat diet decreases H3K27ac in mice adipose-derived stromal cells. OBESITY, v. 30, n. 10, p. 10-pg., 2022-09-05. (19/13618-9, 19/26240-4, 18/05485-6)

THOMAZ, FERNANDA MALANCONI; SIMAO, JUSSARA DE JESUS; DA SILVA, VIVIANE SIMOES; FORCELINI MACHADO, MEIRA MARIA; OYAMA, LILA MISSAE; RIBEIRO, ELIANE BERALDI; CARDOSO ALONSO VALE, MARIA ISABEL; TELLES, MONICA MARQUES. Ginkgo biloba Extract Stimulates Adipogenesis in 3T3-L1 Preadipocytes. PHARMACEUTICALS, v. 15, n. 10, p. 14-pg., 2022-10-01. (14/18929-9, 19/13618-9)

SIMAO, JUSSARA J.; CRUZ, MAYSA M.; ABDALA, FERNANDA M.; BOLSONI-LOPES, ANDRESSA; ARMELIN-CORREA, LUCIA; ALONSO-VALE, MARIA ISABEL C.. Palmitoleic Acid Acts on Adipose-Derived Stromal Cells and Promotes Anti-Hypertrophic and Anti-Inflammatory Effects in Obese Mice. PHARMACEUTICALS, v. 15, n. 10, p. 14-pg., 2022-10-01. (19/26240-4, 19/13618-9)