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Anticorpos contra o SARS-CoV-2 do plasma de vacinados: dinâmica da resposta humoral, sequenciamento, expressão e efetividade dos recombinantes para terapia e diagnóstico

Resumo

O vírus SARS-CoV-2, causador da COVID-19, se espalhou rapidamente por todas as regiões do mundo, ocasionando na pandemia decretada em março de 2020. O método preventivo contra a infecção viral atualmente adotado por diversos países é a vacinação. Um grande número de estudos clínicos está em andamento com o intuito de se encontrar fármacos ou procedimentos efetivos contra a doença. Uma opção é a imunoterapia com o plasma de convalescentes. Essa abordagem foi utilizada anteriormente contra outras doenças infecciosas graves como a SARS, MERS e Ebola, por exemplo, tendo melhorado a taxa de sobrevivência de pacientes. Apesar de potencialmente efetiva, a terapia com o soro de convalescentes apresenta riscos, como possíveis reações imunológicas contra componentes do soro e risco de lesão pulmonar aguda relacionada à transfusão (TRALI). O soro de convalescentes e dos vacinados contra a COVID-19 contém anticorpos neutralizantes contra o vírus, mas também anticorpos não específicos e uma série de outros compostos. O isolamento apenas dos anticorpos neutralizantes para o tratamento dos pacientes poderia torná-lo significativamente mais efetivo, além de diminuir a possibilidade de reações adversas. Propomos nesse projeto o isolamento de células B e anticorpos específicos contra o SARS-CoV-2 a partir do plasma de vacinados e o sequenciamento por metodologias baseadas em transcriptômica e espectrometria de massas. Após a determinação das sequências das regiões variáveis dos domínios leves e pesados, expressaremos o anticorpo completo em células HEK293T. Por fim, avaliaremos a afinidade, sensibilidade de reconhecimento dos anticorpos e fragmentos expressos contra proteínas virais e a efetividade de neutralização do vírus ativo em culturas de linhagens celulares Vero E6 (AU)

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