Avaliação da expressão de fatores de transcrição e microRNA como loops co-regulatórios em lesões de endometriose pélvica e sua correlação com intensidade de doença e fibrose

• Processo: 21/12505-6
• Modalidade de apoio: Auxílio à Pesquisa - Regular
• Área do conhecimento: Ciências da Saúde - Medicina
• Pesquisador responsável: Maurício Simões Abrão
• Beneficiário: Maurício Simões Abrão
• Instituição Sede: Hospital de Beneficência Portuguesa de São Paulo. Real e Benemérita Associação Portuguesa de Beneficência de São Paulo (RBAPB). São Paulo , SP, Brasil
• Pesquisadores associados: Mario Hiroyuki Hirata
• Assunto(s): Endometriose Epigenômica Fatores de transcrição MicroRNAs Ginecologia
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: endometriose | epigenética | fatores de transcrição | miRNA | Ginecologia

Resumo

A Endometriose é considerada uma doença benigna, mas com mecanismo de invasão de tumor maligno. Muitas pesquisas mostram que os Fatores de Transcrição (FT) desempenham um papel significativo na ocorrência e no desenvolvimento do câncer. Entretanto, a pesquisa sobre FT na endometriose ainda é pouco explorada. Acredita-se que os miRNA, podem regular a função dos FT em algumas doenças, incluindo a endometriose. A evidência existente apoia a capacidade de muitos miRNA de interagir com fatores de transcrição formando uma rede para a regulação gênica que produz loops de feedback negativo e positivo. A elucidação dos mecanismos e vias envolvidas na patogênese da endometriose, incluindo os loops regulatórios FT-miRNA, pode permitir o desenvolvimento de meios mais específicos de prevenção e terapia não apenas da endometriose, mas também de neoplasias. O objetivo desse estudo é avaliar o perfil de expressão de Loops co-regulatórios - fatores de transcrição e microRNA em lesões de endometriose pélvica superficial, ovariana e profunda e sua correlação com intensidade de doença e fibrose. Serão analisadas amostras de de tecido das pacientes com endometriose (Grupo A) e sem endometriose (Grupo B). O mRNA das células microdissecadas será extraído com o kit miRNaesy mini kit. A síntese do cDNA será realizada utilizando o kit High-Capacity cDNA Reverse Transcription. A análise da expressão dos fatores de transcrição será realizada em formato de arranjos utilizando a plataforma Taqman® Array Plate - Human_Transcription_Factors. Para a análise de miRNA serão utilizadas as amostras extraídas anteriormente com a síntese de cDNA feita utilizando o kit miScript II RT. O perfil de expressão de miRNA será realizada em formato de arranjos utilizando o kit miScript miRNA PCR array Human Tumor Suppressor miRNAs. Os resultados da RT-qPCR serão analisados utilizando o GeneGlobe Data Analysis Center. A análise comparativa da expressão gênica e dos miRNA das pacientes com e sem endometriose será realizada utilizando o método comparativo de CT. Resultados de fold change >2 e com valores de p <0,05 serão considerados biologicamente significativos. Os resultados serão analisados utilizando o software SPSS V.25.0 e o nível de significância adotado será de p<0,05. (AU)