Multimodel Drug Screening Platform (MDSP): insights pré-clínicos e moleculares para o gerenciamento dos Cânceres de Cólon e Fígado

• Processo: 22/06082-8
• Modalidade de apoio: Auxílio à Pesquisa - Projeto Geração
• Data de Início da vigência: 01 de junho de 2023
• Data de Término da vigência: 31 de maio de 2028
• Área do conhecimento: Ciências da Saúde - Medicina - Anatomia Patológica e Patologia Clínica
• Pesquisador responsável: Guilherme Ribeiro Romualdo
• Beneficiário: Guilherme Ribeiro Romualdo
• Instituição Sede: Faculdade de Medicina (FMB). Universidade Estadual Paulista (UNESP). Campus de Botucatu. Botucatu , SP, Brasil
• Pesquisadores associados: Bruno Cogliati ; Fernando Salvador Moreno ; Flávia Karina Delella ; Luís Fernando Barbisan ; Maria Angel Garcia Chaves ; Rui Manuel Vieira Reis
• Bolsa(s) vinculada(s): 24/09284-6 - Compostos Bioativos de alimentos e a sua potencial promoção da resposta antitumoral no câncer de cólon: Uma análise in vitro e in vivo de sua influência sobre a Imunoterapia e Quimioterapia., BP.MS; 24/06431-8 - Implicações do composto bioativo fenetil isotiocianato sobre a imuno e quimioterapia combinadas para o câncer de cólon: uma investigação in vitro., BP.IC; 23/08751-7 - Multimodel Drug Screening Platform (MDSP): insights pré-clínicos e moleculares para o gerenciamento dos cânceres de cólon e fígado, BP.GR
• Assunto(s): Patologia Carcinoma hepatocelular Cólon Fígado Compostos bioativos
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: carcinoma colorretal | carcinoma hepatocelular | Compostos bioativos | Terapia Antitumoral | Patologia

Resumo

O Carcinoma Hepatocelular (CHC) e o Carcinoma Colorretal (CCR) são neoplasias de grande incidência e mortalidade mundialmente, e ambas possuem mau prognóstico. Muitos pacientes acometidos, em geral, em estágios avançados, recorrem às terapias sistêmicas de baixa responsividade. A modulação do microambiente tumoral também é negligenciada nas terapias antineoplásicas. Os estudos epidemiológicos mais proeminentes destacam que o consumo de café e hortaliças pode reduzir o risco para o CHC e CCR, respectivamente. Esses alimentos são reservatórios de diversos compostos bioativos (CBs) que já demonstraram efeitos antiproliferativos, pró-apoptóticos e anti-inflamatórios em estudos pré-clínicos, como a cafeína (CAF), o ácido clorogênico (ACG), o kawheol (KWL), o fenetil isotiocianato (PEITC) e a ²-criptoxantina (BCX). Pela necessidade de aumento de eficácia das terapias atuais, avaliaremos se a administração - isolada ou em combinação - (1) do alcaloide CAF, do diterpeno KWL e do polifenol ACG, abundantes no café, promovem melhora na resposta antitumoral da terapia com Sorafenibe ou imunoterapia com Atezolizumabe+Bevacizumabe em modelos in vivo, in vitro e ex vivo de CHC; (2) do isotiocianato PEITC, do polifenol ACG, e do carotenoide BCX, abundantes em hortaliças, promovem melhora na resposta antitumoral da terapia com 5-fluorouracil+Bevacizumabe em modelos in vivo, in vitro e ex vivo de CCR. Para tanto, estabeleceremos modelos de co-cultivo de células tumorais de CHC (HepG2) e células estreladas (LX2) ou células tumorais de CCR (HCT-116) e fibroblastos (CCD-18Co). Os co-cultivos serão tratados com os CBs - isoladamente ou em combinação - e com as respectivas terapias por 24 ou 48 h. Avaliaremos viabilidade (MTT), citotoxicidade (LDH), motilidade (scratch assay), invasão (transwell assay) e imunoexpressão de Ki-67 (proliferação), caspase-3 (apoptose) e VEGF (angiogênese). Em seguida, será calculado o Índice Combinatório (IC) e as combinações com resultados aditivos/sinérgicos serão selecionadas para o estudo in vivo. Camundongos BALB/c nude serão submetidos à modelo de tumores xenográficos pela implantação de tumores formados de células HepG2/LX2 ou HCT-116/CCD-18Co. Os animais serão tratados com os CBs selecionados e respectivas terapias, e será avaliada imunoexpressão de Ki-67, caspase-3, CD31 e VEGF, e as principais vias tumorigênicas e de microambiente tumoral ao nível transcriptômico (NanoString) nos tumores. Validaremos as principais vias alteradas ao nível proteico (imunoistoquímica e immunoblot) em amostras humanas, utilizando-se das técnicas de Precision Cut Slices e Patient-derived xenografts. Amostras humanas de CCR ou CHC serão coletadas, cultivadas (Brasil) ou implantadas em camundongos imunossuprimidos (Espanha), e tratadas com as terapias selecionadas. O projeto também envolve o estabelecimento de uma empresa para venda, assessoria e execução de testes farmacológicos nos sistemas in vivo, in vitro e ex vivo estabelecidos, além de um projeto de extensão universitária voltado à nutrição/divulgação científica. (AU)

Publicações científicas

(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)

ROMUALDO, GUILHERME RIBEIRO; HEIDOR, RENATO; BACIL, GABRIEL PRATA; MORENO, FERNANDO SALVADOR; BARBISAN, LUIS FERNANDO. Past, present, and future of chemically induced hepatocarcinogenesis rodent models: Perspectives concerning classic and new cancer hallmarks. Life Sciences, v. 330, p. 16-pg., 2023-10-01. (23/08751-7, 22/16633-1, 22/13402-9, 22/06082-8)