Xenotransplante bem sucedido de células testiculares após quimioterapia fracionada de aves receptoras

• Processo: 23/14240-5
• Modalidade de apoio: Auxílio à Pesquisa - Publicações científicas - Artigo
• Data de Início da vigência: 01 de fevereiro de 2024
• Data de Término da vigência: 31 de julho de 2024
• Área do conhecimento: Interdisciplinar
• Pesquisador responsável: Ricardo Jose Garcia Pereira
• Beneficiário: Ricardo Jose Garcia Pereira
• Instituição Sede: Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia (FMVZ). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Chemotherapy | Germ cell transplantation | poultry | Sterilization | testis | Periódico engloba várias áreas das ciências biológicas e médicas

Resumo

Um passo essencial para o sucesso do transplante de células germinativas é a preparação do ambiente testicular do receptor para aumentar a disponibilidade de nichos de células-tronco. No entanto, a maioria dos métodos para este fim em aves enfrenta sérias limitações, tais como depleção parcial de células germinativas, elevada toxicidade e mortalidade, ou a necessidade de utilizar tecnologias caras. Aqui, validamos uma técnica simples e prática de transferência de células testiculares de codorna para testículos de galinha depletados de células germinativas endógenas por quimioterapia fracionada (busulfan 20 mg/kg/semana por 5 semanas). Este protocolo resultou em uma mortalidade muito baixa dos pintinhos de um dia tratados e, apesar da manutenção da atividade androgênica, a produção de espermatozoides foi reduzida em 84,3% às 25 semanas de idade. A imunocoloração NANOG revelou que muito poucas ou nenhumas células germinativas estavam presentes após o tratamento com 20 e 40 mg/kg, respectivamente. Os dados de RT-qPCR também mostraram que a expressão de c-MYC e NANOG diminuiu nesses tratamentos, mas as expressões de GRF±1 e BID permaneceram inalteradas entre os grupos. Após o xenotransplante, células germinativas de codorna foram imunodetectadas em testículos de galinha usando um anticorpo específico da espécie (QCPN), e DNA de ovalbumina de codorna foi encontrado em amostras seminais coletadas de receptores de galinhas. Juntos, esses dados confirmam que a administração fracionada de bussulfano em filhotes é um protocolo prático, eficaz e seguro para preparar aves machos receptoras capazes de apoiar a espermatogênese xenogênica. (AU)