Estudo do potencial terapêutico de peptídeos gerados por Galleria mellonella utilizando a técnica de mascaramento de epítopos

• Processo: 23/03240-4
• Modalidade de apoio: Auxílio à Pesquisa - Regular
• Data de Início da vigência: 01 de fevereiro de 2024
• Data de Término da vigência: 30 de abril de 2026
• Área do conhecimento: Ciências da Saúde - Farmácia
• Pesquisador responsável: Andrei Moroz
• Beneficiário: Andrei Moroz
• Instituição Sede: Faculdade de Ciências Farmacêuticas (FCFAR). Universidade Estadual Paulista (UNESP). Campus de Araraquara. Araraquara , SP, Brasil
• Município da Instituição Sede: Araraquara
• Pesquisadores associados: Ana Marisa Fusco Almeida ; Maria José Soares Mendes Giannini
• Bolsa(s) vinculada(s): 24/23402-1 - Plataformas terapêuticas para paracoccidioidomicose, BP.PD; 24/23484-8 - Produção e caracterização de anticorpos monoclonais anti-Cryptococcus neoformans utilizando protocolo de imunização subtrativa de múltiplas tolerizações (ISMT) e mascaramento de epítopos, BP.DD; 23/17852-1 - Aplicação da técnica de mascaramento de epítopos utilizando G. mellonella como modelo na infecção por C. neoformans, BP.TT
• Assunto(s): Anticorpos Galleria mellonella Biologia celular
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Animais alternativos | Anticorpos | Galleria mellonella | Interação Fungo-hospedeiro | marcaramento de antígeno | Biologia Celular

Resumo

Estudos do curso de patologias humanas são importantes para a compreensão demecanismos, identificação de alvos terapêuticos e possíveis tratamentos. Considerando as pesquisas desenvolvidas atualmente, uma das problemáticas apresentadas se refere aosanimais a serem utilizados, uma vez que essa temática possui muitos desdobramentos científicos e éticos. Sendo assim, o uso de animais alternativos aparece como uma alternativa para estudos in vivo devido à sua complexidade e por possuir vias metabólicas capazes de elucidar tópicos relacionados ao estudo de doenças. Um deles, a Galleria mellonella, é um inseto pertencente aos Lepidópteros, também conhecida como traça do mel. Possui seu estágio larval que desperta bastante interesse na ciência devido à sua alta gama de possibilidades investigativas, como a resposta imune gerada por hemócitos e peptídeos, descritos por alguns autores como uma resposta humoral. Outra vertente de pesquisa é a sua utilização para estudos de interação fungohospedeiro, em alguns desses estudos, o modelo demonstrou que durante a infecção de Cryptococcus neoformans foi possível delinear resultados que elucidavam o curso da patogênese no inseto, relacionando fatores de virulência do fungo e resposta imune inata. Aliado a isso, na busca por métodos que possam contribuir na descoberta de novos biomarcadores tumorais, ou até mesmo novos alvos terapêuticos, a técnica de mascaramento de antígeno tem se mostrado atraente, pois modula o sistema imune, ao passo que direciona a geração de anticorpos/peptídeos contra epítopos raros, de baixa expressão, que podem possuir um papel relevante no estabelecimento de doenças. Sendo assim, o presente projeto propõe o uso de uma técnica de mascaramento de epítopos para limitar a disposição de antígenos expostos ao sistema imune de Galleria mellonella para avaliar sua resposta imune quanto à produção de peptídeos antimicrobianos, e comparar a plasticidade dessa resposta imune em relação aos controles (não-mascarados). Dentre as análises que elucidarão essas dúvidas, estão o isolamento e purificação de peptídeos por cromatografia, e a caracterização biológica dos mesmos frente ao microrganismo utilizado como imunizante, visando identificar atividade microbiana. Ademais, será realizado o sequenciamento, por espectrometria de massas, para identificar a composição de aminoácidos presentes nesses peptídeos. (AU)