Caracterização fenotípica por microscopia raman, ters e snom em fibras musculares esquelética de camundongos

• Processo: 23/04564-8
• Modalidade de apoio: Auxílio à Pesquisa - Regular
• Data de Início da vigência: 01 de abril de 2024
• Data de Término da vigência: 31 de março de 2027
• Área do conhecimento: Ciências Exatas e da Terra - Física - Física da Matéria Condensada
• Pesquisador responsável: Anderson Zanardi de Freitas
• Beneficiário: Anderson Zanardi de Freitas
• Instituição Sede: Instituto de Pesquisas Energéticas e Nucleares (IPEN). São Paulo , SP, Brasil
• Município da Instituição Sede: São Paulo
• Pesquisadores associados: Anselmo Sigari Moriscot ; Niklaus Ursus Wetter
• Bolsa(s) vinculada(s): 25/16558-8 - Estudo de fibras musculares esqueléticas em camundongos durante o envelhecimento através de espectroscopia Raman e quimiometria, BP.PD; 24/07162-0 - Técnicas espectroscópicas raman associada à bioinformática aplicada a fenotipagem de células musculares esqueléticas de camundongos, BP.TT
• Assunto(s): Espectroscopia Raman Biofísica
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Análise Espectral Raman | caracterização de fibras musculares | espectroscopia Raman | fenotipagem celular | biofísica

Resumo

A tipificação de fibras musculares esqueléticas em oxidativas ou glicolíticas tem grande importância, tanto para a área de histologia, quanto para área de biomarcador de diagnóstico em tempo real, notadamente na área esportiva. As análises de fenotipagem clássicas são realizadas por microscopia de imunofluorescência, usando anticorpos primários e secundários compatíveis, sendo um desafio técnico elevado, pois envolve altos custos e grande demanda de tempo no preparo de amostra. Dessa forma, a identificação e caracterização de novas técnicas de tipificação de células musculares com alta precisão e sensibilidade, menor custo e tempo de preparo da amostra, possuem grande potencial de inovação. Nesse sentido, a técnica de microscopia Raman pode ser útil para fenotipagem de células musculares, por permitir a aquisição de uma assinatura espectral específica para cada tipo de fibra muscular auxiliado com imagens microscópicas. Para essa finalidade utilizaremos músculos sóleo criopreservados que serão retirados de camundongos, posteriormente fixados em paraformaldeído (4 %) e acomodados em lâmina de vidro. O estudo de microscopia Raman será realizado na faixa espectral de 500 a 3600 cm-1, utilizando lasers com comprimentos de onda de 473, 532, 633, 785 e 1064 nm para classificar as fibras, tipo I, tipo II, tipo IIa, tipo IIx e tipo IIb, usando anticorpos primários e secundários. Além disso, outras técnicas sofisticadas de espectroscopia Raman, como o TERS (tip enhenced Raman spectroscopy), serão também estudadas para efeito de comparação com a técnica de microscopia Raman convencional para fenotipagem de células musculares. (AU)