Caracterização bioquímica, estrutural e celular de Miosina-V

• Processo: 99/03951-7
• Modalidade de apoio: Auxílio à Pesquisa - Temático
• Data de Início da vigência: 01 de setembro de 1999
• Data de Término da vigência: 31 de julho de 2004
• Área do conhecimento: Ciências Biológicas - Bioquímica - Biologia Molecular
• Pesquisador responsável: Roy Edward Larson
• Beneficiário: Roy Edward Larson
• Instituição Sede: Faculdade de Medicina de Ribeirão Preto (FMRP). Universidade de São Paulo (USP). Ribeirão Preto , SP, Brasil
• Pesquisadores principais: Enilza Maria Espreafico
• Auxílio(s) vinculado(s): 04/05211-0 - Gustavo Egea | Fac. Medicina Univ. Barcelona - Espanha, AV.EXT
• Bolsa(s) vinculada(s): 02/09966-0 - Caracterização celular e molecular da interação de miosina-Va com a proteína quinase, dependente de calmodulina tipo II (CaMKII), BP.DR; 02/10085-9 - Clonagem, sequenciamento e caracterizacao do p65 de lobulos opticos de lula., BP.IC; 01/11322-1 - Estudo das funções de miosinas da classe V na polarização celular e expressão de moléculas de superfície em linhagens de leucócitos humanos, BP.MS; + mais bolsas vinculadas 02/00208-6 - Expressao, purificacao e cristalizacao do(s) complexo(s) calmodulina/motivos iq do dominio pescoco da miosina-va., BP.IC; 01/09657-5 - Efeito de bdm sobre a miosina-va de cerebro., BP.IC; 01/04637-6 - Estudos de cinetica rapida da miosina-v de cerebro: mecanismos de regulacao do ciclo mecanoquimico., BP.PD; 00/08162-0 - Caracterização bioquímica, estrutural e celular da miosina-V, BP.TT; 00/03722-7 - Caracterização bioquímica, estrutural e celular da miosina V, BP.TT; 99/12366-0 - Mapeamento dos dominios da cauda globular da miosina-va envolvidos no direcionamento a sitios subcelulares especificos., BP.PD - menos bolsas vinculadas
• Assunto(s): Proteínas Miosinas Citoesqueleto Movimento celular Hibridização in situ Microscopia
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Citoesqueleto | Estrutura/Funcao De Proteinas | Mecanoenzima | Miosina | Motilidade Celular | Motor Molecular

Resumo

A superfamília de miosinas inclui 16 classes de moléculas estruturalmente distintas. Enquanto a descoberta de novas classes de miosinas parece já estar se esgotando, novos membros de classes já descritas estão ainda sendo identificados em muitos organismos e tipos celulares. O desafio atual está na tentativa de definir as propriedades bioquímicas e o papel celular exato destes motores moleculares. O objetivo principal deste projeto é a caracterização molecular e celular de miosina-V, uma mecanoenzima postulada ser envolvida com a localização, transporte, e/ou ancoragem de organelas em células eucarióticas. Utilizamos abordagens bioquímicas, técnicas de DNA recombinante, modelos experimentais de células em cultura envolvendo transfecções, imuno-marcações e sondas fluorescentes, análise por vídeo microscopia e confocal, e fracionamento subcelular com análise de ultraestrutura por microscopia eletrônica. O projeto visa dar continuidade a nossos estudos que já contribuíram para que a miosina-V seja uma das miosinas "não-convencionais" melhor caracterizada. As questões principais são: Como que a estrutura e organização dos domínios da miosina-V refletem nas suas propriedades bioquímicas? Quais são as funções da miosina-V nas células e sua relação com a função e dinâmica do citoesqueleto? Esperamos avançar o conhecimento básico sobre a função e regulação de motores moleculares em vertebrados, mas também há implicações para doenças e disfunções celulares de interesse médico - mutações em miosina-V leva a Doença de Griscelli, com problemas neurológicos e imunológicos graves, e miosina-V é essencial para o funcionamento normal de melanócitos, influindo sobre a pigmentação e provavelmente o crescimento de tumores. Portanto o projeto também visa aplicações potenciais na área biomédica. (AU)