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Caracterização bioquímica, estrutural e celular de Miosina-V

Processo: 99/03951-7
Linha de fomento:Auxílio à Pesquisa - Temático
Vigência: 01 de setembro de 1999 - 31 de julho de 2004
Área do conhecimento:Ciências Biológicas - Bioquímica - Biologia Molecular
Pesquisador responsável:Roy Edward Larson
Beneficiário:Roy Edward Larson
Instituição-sede: Faculdade de Medicina de Ribeirão Preto (FMRP). Universidade de São Paulo (USP). Ribeirão Preto , SP, Brasil
Pesquisadores principais:Enilza Maria Espreafico
Auxílios(s) vinculado(s):04/05211-0 - Gustavo Egea | Fac. Medicina Univ. Barcelona - Espanha, AV.EXT
Bolsa(s) vinculada(s):02/09966-0 - Caracterização celular e molecular da interação de miosina-Va com a proteína quinase, dependente de calmodulina tipo II (CaMKII), BP.DR
02/10085-9 - Clonagem, sequenciamento e caracterização do p65 de lóbulos ópticos de Lula, BP.IC
01/11322-1 - Estudo das funções de miosinas da classe V na polarização celular e expressão de moléculas de superfície em linhagens de leucócitos humanos, BP.MS
+ mais bolsas vinculadas 02/00208-6 - Expressão, purificação e cristalização do(s) complexo(s) calmodulina/motivos IQ do domínio pescoço da miosina-Va, BP.IC
01/09657-5 - Efeito de BDM sobre a miosina-Va de cérebro, BP.IC
01/04637-6 - Estudos de cinética rápida da miosina-V de cérebro: mecanismos de regulação do ciclo mecanoquímico, BP.PD
00/08162-0 - Caracterização bioquímica, estrutural e celular da miosina-V, BP.TT
00/03722-7 - Caracterização bioquímica, estrutural e celular da miosina V, BP.TT
99/12366-0 - Mapeamento dos domínios da cauda globular da miosina-Va envolvidos no direcionamento a sítios subcelulares específicos, BP.PD - menos bolsas vinculadas
Assunto(s):Proteínas  Miosinas  Citoesqueleto  Movimento celular  Hibridização in situ  Microscopia 

Resumo

A superfamília de miosinas inclui 16 classes de moléculas estruturalmente distintas. Enquanto a descoberta de novas classes de miosinas parece já estar se esgotando, novos membros de classes já descritas estão ainda sendo identificados em muitos organismos e tipos celulares. O desafio atual está na tentativa de definir as propriedades bioquímicas e o papel celular exato destes motores moleculares. O objetivo principal deste projeto é a caracterização molecular e celular de miosina-V, uma mecanoenzima postulada ser envolvida com a localização, transporte, e/ou ancoragem de organelas em células eucarióticas. Utilizamos abordagens bioquímicas, técnicas de DNA recombinante, modelos experimentais de células em cultura envolvendo transfecções, imuno-marcações e sondas fluorescentes, análise por vídeo microscopia e confocal, e fracionamento subcelular com análise de ultraestrutura por microscopia eletrônica. O projeto visa dar continuidade a nossos estudos que já contribuíram para que a miosina-V seja uma das miosinas "não-convencionais" melhor caracterizada. As questões principais são: Como que a estrutura e organização dos domínios da miosina-V refletem nas suas propriedades bioquímicas? Quais são as funções da miosina-V nas células e sua relação com a função e dinâmica do citoesqueleto? Esperamos avançar o conhecimento básico sobre a função e regulação de motores moleculares em vertebrados, mas também há implicações para doenças e disfunções celulares de interesse médico - mutações em miosina-V leva a Doença de Griscelli, com problemas neurológicos e imunológicos graves, e miosina-V é essencial para o funcionamento normal de melanócitos, influindo sobre a pigmentação e provavelmente o crescimento de tumores. Portanto o projeto também visa aplicações potenciais na área biomédica. (AU)