Envolvimento de macrófagos na determinação do microambiente hepático na progresão de esteatohepatite (NASH) para carcinoma hepatocelular (HCC)

• Processo: 24/01970-8
• Modalidade de apoio: Auxílio à Pesquisa - Regular
• Data de Início da vigência: 01 de julho de 2024
• Data de Término da vigência: 30 de junho de 2026
• Área do conhecimento: Ciências Biológicas - Fisiologia - Fisiologia de Órgãos e Sistemas
• Acordo de Cooperação: CNPq
• Pesquisador responsável: William Tadeu Lara Festuccia
• Beneficiário: William Tadeu Lara Festuccia
• Instituição Sede: Instituto de Ciências Biomédicas (ICB). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
• Vinculado ao auxílio: 20/04159-8 - Biologia e envolvimento de mTORC2 e mTORC1 no desenvolvimento da esteatose hepática e progressão para esteatohepatite e hepatocarcinoma, AP.TEM
• Bolsa(s) vinculada(s): 24/11195-1 - Papel dos macrófagos na determinação do microambiente hepático e progressão da esteato-hepatite (NASH) para carcinoma hepatocelular (HCC), BP.JD
• Assunto(s): Carcinoma hepatocelular Fígado gorduroso Macrófagos Metabolismo
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: carcinoma hepatocelular | Esteatohepatite | Macrófagos | microambiente hepático | Metabolismo

Resumo

80-90% dos casos de HCC primário ocorrem como progressão da esteatohepatite (NASH), ou seja, em fígados acometidos por inflamação crônica. Neste estudo iremos investigar como a inflamação crônica do fígado modula o microambiente favorecendo a evasão imunológica e progressão da NASH para o HCC com foco especial na caracterização do papel das células de Kupffer e macrófagos recrutados como determinantes destes processos. Para isto, utilizaremos 2 modelos murinos que apresentam progressão de NASH para HCC bem definidas: 1- camundongos com deleção de Pten em hepatócitos, que apresentam progressão de NASH para HCC independentemente da dieta devido a exacerbada síntese de lipídeos; e 2- camundongos com deleção de Raptor em hepatócitos que desenvolvem tumores após alimentação com dieta hiperlipídica e tratamento com o carcinogênio CCL-4. No primeiro protocolo, estes camundongos serão eutanasiados após NASH ou HCC para a caracterização dos leucócitos residentes no fígado (células de Kupffer, macrófagos recrutados, neutrófilos, linfócitos etc) por FACs e RNAseq, deposição de lipídeos e estágio de fibrose, perfil de citocinas e quimiocinas, perfil de metabólitos, sinalização inflamatória nas vias TLR4, NLRP3-inflamassoma, MAPK e PI3K-mTOR, metabolismo de lipídeos e glicose, função mitocondrial, estresse oxidativo e lesão de DNA. Em um segundo protocolo, ambos modelos serão avaliados para os mesmos parâmetros que no protocolo 1 após depleção de macrófagos com clodronato durante 4 semanas antes da NASH e HCC com o objetivo de investigar o papel de macrófagos no desenvolvimento destas doenças. Assim, iremos aprender sobre os aspectos críticos inflamatórios que determinam o microambiente hepático propício a evasão imune e progressão do NASH para o HCC. Este conhecimento pode contribuir ao desenvolvimento de novas estratégias de prevenção e tratamento do HCC. (AU)