Avaliação biológica de 3 fragmentos polipeptídicos do receptor de alfa interferon humano, domínio extra celular

• Processo: 94/04208-2
• Modalidade de apoio: Auxílio à Pesquisa - Regular
• Vigência: 01 de março de 1995 - 31 de março de 1997
• Área do conhecimento: Ciências Biológicas - Imunologia - Imunoquímica
• Pesquisador responsável: Mario Hiroyuki Hirata
• Beneficiário: Mario Hiroyuki Hirata
• Instituição Sede: Faculdade de Ciências Farmacêuticas (FCF). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
• Assunto(s): DNA complementar Interferon alfa Interferon tipo I
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Cdna | Interferon Alfa | Receptor Tipo I

Resumo

Será sub-clonado e expressos 3 fragmentos do receptor alfa interferon humano, domínio extra-celular e será avaliada a atividade biológica desses fragmentos. Os fragmentos para a sub-clonagem serão gerados por PCR utilizando o cDNA do receptor do alfa interferon como template acrescentando nos primers os sítios das enzimas de restrição Hind III e Nde I, EcoRI e BamHI, NdeI e EcoRI p/os fragmentos 1, 2 e 3 respectivamente. Serão clonados em vetor plamidial T7 dependente contendo gene de resistência a ampicilina. Após a confirmação da clonagem por gel de agarose, os fragmentos serão inseridos em bactérias E.coli cepa JM109 ou BL 21(DE3) plySs. A seguir serão expressos os polipeptídeos e testados em relação a atividades biológicas com interferon radioativo. (AU)