Estudo de Estabilidade, Reprodutibilidade e Escalonamento dos Kits de Cell-free Protein sintesis SynthEasy®

• Processo: 24/04215-6
• Modalidade de apoio: Auxílio à Pesquisa - Pesquisa Inovativa em Pequenas Empresas - PIPE
• Área do conhecimento: Interdisciplinar
• Pesquisador responsável: Phelipe Augusto Mariano Vitale
• Beneficiário: Phelipe Augusto Mariano Vitale
• Empresa: Biolinker Biologia Sintética Eireli
• CNAE: Pesquisa e desenvolvimento experimental em ciências físicas e naturais
• Município: Cotia
• Pesquisadores principais: Douglas Dalle Luche
• Vinculado ao auxílio: 23/09974-0 - Estudo de Estabilidade, Reprodutibilidade e Escalonamento dos Kits de Cell-free Protein sintesis SynthEasy®, AP.PIPE
• Bolsa(s) vinculada(s): 24/17245-0 - Estudo de Estabilidade, Reprodutibilidade e Escalonamento dos Kits de Cell-free Protein sintesis SynthEasy®, BP.PIPE
• Assunto(s): Escalonamento Expressão de proteínas Liofilização Biologia sintética
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Escalonamento | Expressão de proteínas | liofilização | Ressonância Magnética Nuclear (RMN) | Síntese de Proteínas Livres de Células (CFPS) | Biologia Sintética

Resumo

A Biolinker é a única empresa nacional a comercializar uma ferramenta de biotecnologia chamada Síntese de Proteínas Livres de Células (CFPS), que permite a produção acelerada de proteínas de interesse científico e comercial. Esta tecnologia, cujos kits se baseiam em extratos de Escherichia coli, supera desafios técnicos presentes na produção em organismos vivos e já recebeu financiamento da FAPESP para o desenvolvimento de uma versão liofilizada (2019/16625-6). A CFPS tem se mostrado fundamental para processos biotecnológicos que necessitam de reprodutibilidade e estabilidade do nível de produção de proteínas, linearidade e escalabilidade. Durante a fase de desenvolvimento da versão liofilizada, os kits passaram por diversas modificações na sua composição para manter o rendimento observado antes da liofilização e demonstrar vida útil aumentada em meses. No entanto, ainda existem desafios a serem superados como a alta variabilidade entre os lotes e a dificuldade em obter quantidades significativas de proteínas complexas como anticorpos, que são alvos de interesse biotecnológico.A próxima etapa do desenvolvimento do kit CFPS envolve a pesquisa para o escalonamento do processo, dado que há uma variação significativa na qualidade do produto entre os lotes produzidos. O uso da técnica de Ressonância Magnética Nuclear (RMN) se apresenta como um passo crucial para analisar os extratos obtidos, correlacionar a presença de determinadas moléculas ao longo do processo de expressão proteica e, assim, identificar a causa da variabilidade entre os lotes. Portanto, o objetivo final deste estudo é estabelecer o melhor processo produtivo para os kits CFPS.Durante a fase de desenvolvimento da versão liofilizada, os kits passaram por diversas modificações na composição, foram submetidos à liofilização, conseguindo manter o rendimento de expressão das proteínas e tiveram sua vida útil aumentada. No entanto, ainda existem desafios a serem superados, como a alta variabilidade entre os lotes e a dificuldade em obter quantidades significativas de proteínas complexas, que são alvos de interesse biotecnológico.A próxima etapa do desenvolvimento do kit CFPS envolve a pesquisa para o escalonamento do processo, dado que há uma variação significativa na qualidade do produto entre os lotes produzidos. O uso da técnica de Ressonância Magnética Nuclear (RMN) de pequenas moléculas se apresenta como um passo crucial para analisar os extratos obtidos, correlacionar a presença de determinadas moléculas ao longo do processo de expressão proteica e, assim, identificar a causa da variabilidade entre os lotes. Portanto, o objetivo final deste estudo é estabelecer o melhor processo produtivo para os kits CFPS. (AU)