Estudo dos efeitos do azul de metileno na lesão de isquemia reperfusão em modelo de fibrose hepática secundária a ligadura mista do duto biliar.

• Processo: 24/05750-2
• Modalidade de apoio: Auxílio à Pesquisa - Regular
• Data de Início da vigência: 01 de novembro de 2024
• Data de Término da vigência: 31 de outubro de 2026
• Área do conhecimento: Ciências da Saúde - Medicina - Cirurgia
• Pesquisador responsável: Estela Regina Ramos Figueira
• Beneficiário: Estela Regina Ramos Figueira
• Instituição Sede: Hospital das Clínicas da Faculdade de Medicina da USP (HCFMUSP). Secretaria da Saúde (São Paulo - Estado). São Paulo , SP, Brasil
• Pesquisadores associados: Flávio Henrique Ferreira Galvão ; Joel Avancini Rocha Filho ; Luiz Augusto Carneiro D'Albuquerque ; Márcia Saldanha Kubrusly
• Assunto(s): Azul de metileno Hepatopatias Isquemia reperfusão Gastroenterologia
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: azul de metileno | Doença hepática | Fibrose Hepática Secundária | isquemia reperfusão | Ligadura Mista Do Duto Biliar | Gastroenterologia

Resumo

Introdução: A lesão de isquemia reperfusão hepática (IR) ainda é uma complicação com alta morbidade no transplante de fígado, nas cirurgias de ressecção hepática e no choque hipovolêmico. Apesar da vasta literatura sobre a IR hepática, ha escassez de informações sobre a lesão de isquemia reperfusão (IR) no fígado com fibrose. Por outro lado, ha publicações relacionadas a ressecções hepáticas em pacientes com cirrose, que pode estar associada ha maior incidência de complicações como sangramento e insuficiência hepática pós-operatória. Faltam estudos sobre a fisiopatologia da lesão IR na fibrose hepática.Objetivos: 1) Avaliar a ligadura mista do duto biliar e o tempo para desenvolver a fibrose;2) avaliar os efeitos da lesão de IR nos animais com fibrose hepática por ligadura mista das vias biliares; 3) avaliar os efeitos da administração do azul de metileno na lesão de isquemia reperfusão do fígado com fibrose.Métodos: Um grupo de ratos serão submetidos a ligadura mista do duto biliar e comparado ao grupo clássico para avaliar o desenvolvimento de fibrose em 2, 4, 6, 12 e 24 semanas. Depois, animais com fibrose por ligadura mista do duto biliar serão divididos em 5 grupos com 10 animais. Grupo sham; grupo controle onde animais com fibrose hepática serão submetidos a 60 min de isquemia e 4 horas de reperfusão; grupo azul de metileno 1, animais com fibrose submetidos a IR, tratados com 20 mg/kg de azul de metileno, 5 min antes da isquemia; grupo azul de metileno 2, animais submetidos a IR, tratados com azul de metileno 5 min antes da reperfusão. Será realizado o monitoramento clínico da evolução dos animais com fibrose. Serão avaliadas condições hemodinâmicas com coleta de dados da pressão arterial media e fluxo da veia porta. Ao final dos experimentos será coletado sangue e tecidos como fígado. Serão avaliados parâmetros hemodinâmico pressão arterial media e fluxo portal), exames bioquímicos AST, ALT, fosfatase alcalina, GGT, bilirrubina, albumina, hemograma e creatinina, tempo de protrombina e interleucinas. O tecido hepático será enviado para análise histopatológica, análise do JNK, HIF-1(Hypoxia Inducible Factor 1 Alpha), B-catenina, HMGB-1(High Mobility Group Protein B1) e NFkB, análise do estresse oxidivativo, análise das funções mitocondriais e análise dos genes Nrf2, KEAP-1, ATF3, ATF4, ACTB. (AU)