O papel imunogênico do colágeno do tipo V no desequilíbrio das repostas Th17 e Treg na Doença Pulmonar Obstrutiva Crônica (DPOC)

• Processo: 24/13808-0
• Modalidade de apoio: Auxílio à Pesquisa - Regular
• Data de Início da vigência: 01 de março de 2025
• Data de Término da vigência: 29 de fevereiro de 2028
• Área do conhecimento: Ciências da Saúde - Medicina - Clínica Médica
• Pesquisador responsável: Fernanda Degobbi Tenorio Quirino dos Santos Lopes
• Beneficiário: Fernanda Degobbi Tenorio Quirino dos Santos Lopes
• Instituição Sede: Faculdade de Medicina (FM). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
• Município da Instituição Sede: São Paulo
• Pesquisadores associados: Iolanda de Fátima Lopes Calvo Tibério ; Paulo Francisco Guerreiro Cardoso ; Thais Mauad ; Walcy Paganelli Rosolia Teodoro
• Bolsa(s) vinculada(s): 25/16050-4 - Avaliação dos colágenos tipos I, III e V e sua correlação com o desequilíbrio da resposta Th17/Treg na doença pulmonar obstrutiva crônica (DPOC)., BP.MS; 25/12894-3 - Avaliação dos efeitos da administração de um inibidor específico para IL-17 sobre o processo inflamatório e distribuição dos colágenos tipos I, III e V no tecido pulmonar em camundongos expostos à fumaça de cigarro., BP.DR
• Assunto(s): Pneumologia Colágeno tipo V Colágenos fibrilares Matriz extracelular Linfócitos T reguladores Células Th17 Doença pulmonar obstrutiva crônica Remodelamento pulmonar Resposta imune
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: colágeno tipo V | Dpoc | Remodelamento pulmonar | resposta imune | Pneumologia

Resumo

Há evidências da importância do mecanismo da autoimunidade na progressão da DPOC em decorrência do processo inflamatório crônico induzido pela exposição à fumaça de cigarro. Com a progressão do processo inflamatório, a resposta imune adapatativa mediada pelos linfócitos Th17 tem papel importante neste processo e sua ocorrência tem sido atribuída em parte a uma falha no controle do processo inflamatório mediado pelos linfócitos T reguladores (Treg) via liberação da interleucina anti-inflamatória IL-10. O Col V é um colágeno fibrilar da matriz extracelular (MEC) e é encontrado no interstício pulmonar incorporado nas fibrilas heterotípicas de colágeno I/III, sendo estes dois últimos tipos, os que se apresentam em maior quantidade neste tecido, e por este motivo são os principais responsáveis pelas propriedades físicas que determinam a elasticidade deste tecido. Devido à sua localização, propriedades imunogênicas e antigênicas, o Col V é considerado um antígeno sequestrado, permanecendo oculto do sistema imunológico em condições de normalidade. No entanto, em casos de danos teciduais, como lesão pulmonar da MEC induzida pela expoisção à fumaça de cigarro em decorrência do porcesso inflamatório crônico, os epítopos Col V podem ser expostos ao sistema imunológico, o que pode transformá-los em potenciais autoantígenos. Objetivos: Assim, neste estudo temos como objetivo principal avaliar a distribuição do colágeno tipo V em relação aos tipos I e III e seu papel no desequilíbrio das respostas Th17 e Treg na DPOC. Metodologia: Para tanto, desenvolveremos dois protocolos, um clínico (Protocolo 1) e outro experimental (Protocolo 2). Protocolo 1: Faremos um estudo retrospectivo em amostras de pacientes DPOC graves que foram submetidos à transplante de pulmão. Utilizaremos blocos de parafina de tecido pulmonar destes pacientes fornecidos pelo Serviço de Patologia do Incor. Também serão fornecidos blocos de parafina de tecido pulmonar de pacientes que foram a óbito e que não apresentaram doença pulmonar pelo serviço do SVO da FMUSP. Este material será preparado para confecção de lâminas pelo método de imuno-histoquímica para marcações específicas para os diferentes tipos de colágenos I, III e V, bem como para células específicas e interleucinas envolvidas nas respostas imunes Th17 e Treg. Serão feitas avaliações quantitativas da densidade das diferentes marcações por área de parênquima distal e proximal bem como nos espaços peribrocovasculares dos pulmões destes pacientes. Protocolo 2: A fim de entendermos melhor como a inibição da resposta Th17 poderá interferir no processo de destruição pulmonar e remodelamento dos diferentes tipos de colágeno na DPOC, utilizaremos camundongos C57/Bl 6 (6-8 semanas), os quais serão expostos à fumaça de cigarro para indução de DPOC e receberão a administração de um anticorpo neutralizador para IL-17 (R and D Systems, Abingdon, UK). Serão quatro grupos experimentais, Grupo Fumo: animais expostos à fumaça de cigarro, Grupo Fumo-Anti IL-17: animais expostos à fumaça de cigarro e que receberão administração do neutralizador para IL-17, Grupo Controle: animais que permanecerão sob ar ambiente filtrado e Grupo Controle- Anti IL-17: animais que permanecerão sob ar ambiente filtrado e que receberão administração do neutralizador para IL-17. Serão feitas avaliações da mecânica respiratória, bem como análises histológicas para verificação da presença dos alargamentos dos espaços aéreos distais e para quantificação dos colágenos tipos I, III e V por área de parênquima proximal e distal. Também utilizaremos a técnica da citometria de fluxo para avaliar as diferentes populações de células inflamatórias envolvidas nas respostas Th17 e Treg no homogenato de tecido pulmonar, sendo que parte destas células também serão avaliadas no tecido pulmonar por histologia, nos espaços peribroncovasculares, onde sabemos haver uma maior densidade de células inflamatórias neste modelo experimental. (AU)