"EMU: Aquisição de sistema Triple Quad (QTRAP) Microflow-LC-MS/MS para determinação de mediadores, hormônios e metabólitos em amostras biológicas complexas com quantidades analíticas mínimas"

• Processo: 23/17113-4
• Modalidade de apoio: Auxílio à Pesquisa - Programa Infraestrutura - Pequeno Médio Porte
• Data de Início da vigência: 01 de setembro de 2024
• Data de Término da vigência: 31 de agosto de 2027
• Área do conhecimento: Ciências Biológicas - Imunologia - Imunologia Aplicada
• Pesquisador responsável: Lúcia Helena Faccioli
• Beneficiário: Lúcia Helena Faccioli
• Instituição Sede: Faculdade de Ciências Farmacêuticas de Ribeirão Preto (FCFRP). Universidade de São Paulo (USP). Ribeirão Preto , SP, Brasil
• Pesquisadores associados: Alline Cristina de Campos ; Ana Lúcia da Costa Darini ; Elaine Aparecida Del Bel Belluz Guimarães ; Francisco Silveira Guimaraes ; Francisco Wanderley Garcia de Paula e Silva ; Vera Lúcia Lanchote
• Assunto(s): Eicosanoides Endocanabinoides Espectrometria de massas Hormônios Lipídeos Mediadores da inflamação
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: eicosanóides | Endocanabinóides | espectrometria de massa | hormônios | lipídios | lipidômica quantitativa | Mediadores inflamatórios

Resumo

Nas últimas décadas, os avanços na tecnologia de espectrometria de massas resultaram em um desenvolvimento sem precedentes nas pesquisas científicas biomédicas, aumentando o conhecimento sobre funções de diferentes sistemas biológicos, assim como, sua composição molecular. Estes avanços tecnológicos levaram a criação de campos de pesquisa específicos, como a lipidômica. Neste sentido, a abordagem "ômica" para os lipídios na forma exploratória (untarget) ou quantitiativa (target), pretende correlacionar os dados de estudos que examinam aspectos moleculares em sistemas biológicos, biotecnológicos ou miméticos, aplicados em doenças ou em processos bioquímicos. Estas metodologias são técnicas analíticas com grande sensibilidade e dependentes de espectrometria de massas de última geração e em larga escala. Além disso, dependendo da matriz biológica e sua fonte ou quantidade, deverá ser acoplado um sistema de micro-fluxo em cromatografia líquida para melhor separação, identificação e quantificação dos analitos apolares em quantidades mínimas. A lipidômica surgiu como um componente crucial no estudo integrativo do papel dos genes, das proteínas e dos metabólitos que descrevem por completo uma função celular. Da literatura especializada, dois temas emergem como condutores do renascimento atual da área lipídica: 1) novas descobertas dos sistemas bioquímicos que tem revelado o papel específico das interações lipídios-lipídios ou lipídios-proteínas na regulação celular e 2) perspectiva de identificar lipídios individuais em pequenas quantidades, obtendo cenários completos de classes lipídicas em contextos fisiopatológicos (biomarcadores). Por motivo de grande interesse nas quantificações de lipídios em diversos projetos e a demanda crescente por este tipo de análise, com desafios reais em tamanho amostral e quantidades analíticas mínimas, neste projeto pretendemos adquirir um sistema de espectrômetro de massa (triplo-quadrupolo com QTRAP) para lipidômica quantitativa em modo dirigido ao alvo (target), acoplado ao micro-fluxo de cromatografia líquida, potencializando a sensibilidade analítica para amostras raras e de baixa concentração de analitos em matrizes biológicas complexas. As características principais do equipamento deste projeto EMU são: 1) faixa de massa de 5 a 1.250 m/z abrangendo muitas classes de compostos lipídicos; 2) tempo de comutação de 5 ms no modo MRM, realizando análises de íons positivos e negativos na mesma aquisição, sem comprometer a sensibilidade; 3) uma faixa dinâmica de até seis ordens de magnitude abrangendo concentrações de analitos desde detecção de traços de baixo nível até aquelas em alta abundância; 4) detector dínodo de alta energia e um multiplicador de elétrons multicanal fornecendo dados de alta qualidade para cada aquisição de amostra; 5) taxa de aquisição de MRM de 500 MRM/seg, podendo analisar um amplo conjunto de compostos; 6) velocidade de varredura de 12.000 Da/s, detectando os analitos cruciais em uma amostra complexa. Este equipamento será vinculado à estrutura física e de equipamentos existente no laboratório multiusuário bi-institucional "CEQIL - Centro de Excelência em Quantificação e Identificação de Lipídios" da Faculdade de Ciências Farmacêutica de Ribeirão Preto e do Departamento de Química da Faculdade de Filosofia, Ciências e Letras de Ribeirão Preto - USP, que irá atender aos interesses científicos de diversos grupos de pesquisa do campus da USP- Ribeirão Preto (FCFRP; FMRP; FORP e FFCLRP) e outras unidades de pesquisa e ensino em instituições públicas e/ou privadas. Desta forma, esse equipamento para lipidômica quantificava irá colaborar com o desenvolvimento de pesquisas nas áreas básicas de química, bioquímica, biologia celular e imunologia, como também, nas áreas de clínica médica, odontológica e farmacologia aplicada. Ademais, será um importante ferramenta para auxiliar na formação de profissionais e especialistas nesta área de estudo,proporcionando inovação e competitividade. (AU)