Efeito modulador de fator de necrose tumoral (TNF) e vitamina D sobre expressão do receptor TNFR2 em monócitos e linfócitos de gestantes portadoras de pré-eclâmpsia e na diferenciação de células T reguladoras.

• Processo: 24/14678-3
• Modalidade de apoio: Auxílio à Pesquisa - Regular
• Data de Início da vigência: 01 de abril de 2025
• Data de Término da vigência: 31 de março de 2028
• Área do conhecimento: Ciências Biológicas - Imunologia - Imunologia Aplicada
• Pesquisador responsável: Maria Terezinha Serrão Peraçoli
• Beneficiário: Maria Terezinha Serrão Peraçoli
• Instituição Sede: Instituto de Biociências (IBB). Universidade Estadual Paulista (UNESP). Campus de Botucatu. Botucatu , SP, Brasil
• Município da Instituição Sede: Botucatu
• Pesquisadores associados: Jose Carlos Peraçoli ; Mariana Romão Veiga ; Vanessa Rocha Ribeiro Vasques
• Bolsa(s) vinculada(s): 25/12660-2 - Determinação da expressão dos receptores TNFR1 e TNFR2 além de TNF de membrana por monócitos e análise da expressão desses receptores, immune checkpoints inhibitors e fatores de transcrição por linfócitos empregando a técnica de citometria de fluxo, BP.TT
• Assunto(s): Linfócitos T reguladores Fatores de necrose tumoral Pré-eclâmpsia Vitamina D
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Células T reguladoras | fator de necrose tumoral | monócitos M2 | Pré-eclâmpsia | Tnfr2 | vitamina D | Imunologia Aplicada

Resumo

Introdução: A pré-eclâmpsia (PE) é uma síndrome específica da gravidez caracterizada por ativação de monócitos com perfil inflamatório (M1) em detrimento do perfil anti-inflamatório M2, resultando em níveis elevados de citocinas pró-inflamatórias, como o fator de necrose tumoral (TNF). O TNF é produzido como uma proteína de transmembrana (mTNF) que pode ser clivada pela enzima conversora de TNF (TACE) dando origem ao TNF solúvel (sTNF). A ligação do TNF com os receptores TNFR1 e TNFR2 ativa diferentes vias de sinalização em células das imunidades inata e adaptativa. TNFR1 pode ser ativado por ligação com ambos mTNF e sTNF, enquanto TNFR2 é principalmente ativado por mTNF. O TNFR2 é predominantemente expresso por células T reguladoras CD4+/Foxp3+ e, a co-expressão de CD25 com TNFR2 identifica células com maior capacidade supressora. O balanço entre células Treg e Th17 está comprometido na PE, apresentando polarização para aumento de células Th17 e diminuição de células Treg. Moléculas denominadas immune checkpoints inhibitors, ou biomoléculas com atividade reguladora negativa, estão expressas por células Treg e consideradas responsáveis pelo balanço entre sinais pró e anti-inflamatórios, que ocorrem na interface materno-fetal para garantir a tolerância materna e o sucesso da gestação. Em vista disso, o uso de moduladores da resposta inflamatória como a vitamina D, no tratamento de células de gestantes com PE pode ser importante para melhorar a resposta inflamatória sistêmica através da ativação de células com perfil M2 e Treg capazes de modular e suprimir a inflamação presente nessa síndrome da gestação. Objetivo: Compreender o papel dos receptores de TNF (TNFR1 e TNFR2) em subpopulações de monócitos e linfócitos envolvidos da resposta inflamatória sistêmica de gestantes portadoras de pré-eclâmpsia e, utilizar a vitamina D para modular o perfil inflamatório dessas células e estabelecer o equilíbrio entre imunidade inata e adaptativa na PE. Sujeitos e Métodos: O sangue periférico de 20 gestantes portadoras de PE, 20 gestantes normotensas e 16 mulheres saudáveis, não-grávidas será obtido e as células mononucleares serão cultivadas in vitro na presença ou ausência de TNF ou vitamina D por 4h, 18h ou 24h, sendo a expressão por monócitos dos receptores CD14, TLR4, CD64, CD163, CD206, TNFR1, TNFR2 e mTNF e a expressão de linfócitos T reguladores CD3, CD4, CD25, TNFR1, TNFR2, CD155, CTLA-4, PD-1, TIGIT, GITR, FoxP3 e ROR³t determinada por citometria de fluxo. A concentração das citocinas das TNF, IL-10, IL-17A, TGF-², IL-35, IL-6, e dos receptores solúveis TNFR1 e TNFR2 será determinada no plasma ou no sobrenadante antes e após cultura com TNF e VD, por ensaio imunoenzimático (ELISA). Os resultados serão analisados por testes paramétricos ou não paramétricos com nível de significância de 5%. (AU)