EMU concedido para o projeto 2022/03645-1, para o equipamento, instrumento King Fisher extração de DNA ENA 96 DW HEAD

• Processo: 25/00398-1
• Modalidade de apoio: Auxílio à Pesquisa - Programa Equipamentos Multiusuários
• Data de Início da vigência: 01 de maio de 2025
• Data de Término da vigência: 30 de abril de 2032
• Área do conhecimento: Ciências Biológicas - Microbiologia
• Pesquisador responsável: Maurício Lacerda Nogueira
• Beneficiário: Maurício Lacerda Nogueira
• Instituição Sede: Faculdade de Medicina de São José do Rio Preto (FAMERP). Secretaria de Desenvolvimento Econômico (São Paulo - Estado). São José do Rio Preto , SP, Brasil
• Vinculado ao auxílio: 22/03645-1 - Estudo da interação vírus-vetor e dos mecanismos envolvidos na modulação da dinâmica de transmissão viral, AP.TEM
• Assunto(s): Virologia Biologia molecular Infecções por Arbovirus Sequenciamento de nova geração Aquisição de equipamentos Equipamentos multiusuários Infraestrutura de pesquisa
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Arbovirose | Biologia molecular | Sequenciamento de 2a geração | Virologia

Resumo

Os arbovírus constituem um dos mais diversos grupos de vírus de RNA, os quais são majoritariamente transmitidos por insetos hematófagos, destacando-se mosquitos do gênero Aedes. Na América do Sul, o Brasil é considerado um epicentro para arboviroses emergentes e re-emergentes, uma vez que surtos e/ou epidemias de DENV1-4, YFV, MAYV, ROCV, SLEV, OROV, CHIKV e ZIKV já foram reportadas. A disseminação dessas doenças está amplamente associada a fatores que contribuem para sua dispersão, bem como a características intrínsecas ao vetor capazes de influenciar na sua competência vetorial e, consequentemente, na disseminação das arboviroses. Portanto, este estudo visa investigar os principais mecanismos de interação vírus-vetor-hospedeiro responsáveis pela ampla disseminação das doenças, a fim de fornecer evidências de como proceder diante de epidemias recorrentes por arboviroses, que impactam significativamente a saúde pública diversos municípios brasileiros, como São José do Rio Preto (SJRP). São José do Rio Preto é um município paulista, localizado na região noroeste do estado, acometido por frequentes epidemias de DENV. O DENV foi introduzido em SJRP em 1990 e a partir de então, grandes epidemias foram observadas em 2010, 2013, 2015, 2016 e 2019. Ademais, a cidade tem registros de circulação de outras arboviroses como ZIKV e CHIKV, embora epidemias nunca tenham sido observadas até o momento, o que é facilitado pelos altos índices de infestação vetorial já reportados. Diante desse cenário a hipótese do presente estudo é que diferentes fatores relacionados à biologia vetorial estão afetando a dinâmica de transmissão de arboviroses em SJRP, e influenciando diretamente as recorrentes epidemias de DENV, bem como a ausência de surtos de ZIKV e CHIKV, apesar de evidências mostrarem a circulação ativa desses vírus em humanos, primatas e mosquitos. Portanto, os objetivos a serem respondidos neste estudo compreendem fatores associados a competência vetorial, a qual está amplamente ligada a variabilidade genética de determinadas populações de mosquitos; o fitness viral, que é dependente da linhagem circulante em uma determinada região; o microbioma vetorial e fatores relacionados à persistência da infecção viral no vetor, as quais podem ser modulados pela expressão gênica e regulação da replicação viral, contribuindo para a manutenção da circulação viral em períodos desfavoráveis. Para isso, realizaremos sucessivas coletas de culicídeos, tanto de ovos quanto de adultos, em três diferentes áreas, urbana, peri-urbana e silvestre. A partir das coletas colônias de mosquitos Aedes nativos de SJRP serão estabelecidas e mantidas em insetário, para que, posteriormente, sejam realizados experimentos de competência vetorial, da influência da presença de diferentes microrganismos e ISVs na replicação de arbovírus, além de ensaios de fitness viral, expressão gênica e regulação da replicação viral por meio de microRNAs. Com a coleta de exemplares adultos, iremos realizar experimentos para identificação dos arbovírus circulantes e ISVs e estudos de variabilidade genética populacional. Ensaios de biologia molecular, isolamento viral em cultura celular e sequenciamento genômico das linhagens circulantes na cidade serão realizados. Ao propor este projeto de pesquisa esperamos responder quais são os principais fatores, intrínsecos e extrínsecos, nas diferentes populações de Aedes nativos do município que apresentam capacidade de alterar a competência vetorial. Esses resultados serão associados à diversidade genética das populações de mosquitos com a dinâmica de transmissão dos arbovírus, tentando assim elucidar os mecanismos de fluxo gênico e fitness replicativo ao qual estes vírus são expostos no vetor. (AU)