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Estudos da função fisiológica e potencial biotecnológico de inibidores de proteases e anti-hemostáticos presentes em artrópodes hematófagos

Processo: 05/03514-9
Linha de fomento:Auxílio à Pesquisa - Temático
Vigência: 01 de junho de 2006 - 30 de setembro de 2011
Área do conhecimento:Ciências Biológicas - Bioquímica - Química de Macromoléculas
Pesquisador responsável:Aparecida Sadae Tanaka
Beneficiário:Aparecida Sadae Tanaka
Instituição-sede: Escola Paulista de Medicina (EPM). Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP). Campus São Paulo. São Paulo , SP, Brasil
Pesq. associados:Anita Mitico Tanaka-Azevedo ; Aoi Masuda ; Carlos Termignoni ; Francisco Jose Alves Lemos ; Itabajara da Silva Vaz Junior ; Ivan Torres Nicolau de Campos ; João Alexandre Ribeiro Gonçalves Barbosa ; Marcelo Larami Santoro ; Marcos Horacio Pereira ; Rogerio Amino ; Sergio Schenkman ; Tânia Araújo Viel
Bolsa(s) vinculada(s):09/17589-1 - Purificação e caracterização do inibidor de cisteínoproteases Bmcistatina-2 presente em hemócitos de carrapato Rhipicephalus (Boophilus) microplus, BP.IC
09/06003-6 - Construção de uma biblioteca de inibidores de proteases em Sistema Phage Display e seleção de inibidores específicos para proteases digestivas de larvas de Aedes aegypti, BP.DR
09/50434-1 - Estudos moleculares de subtilisinas hipotéticas de Trypanosoma cruzi, BP.PD
+ mais bolsas vinculadas 07/56614-6 - Estudos bioquímicos de um inibidor de serinoproteases do tipo kakal presente em glândulas salivares do mosquito Aedes aegypti, BP.MS
06/52206-8 - Clonagem, expressão, purificação e caracterização do inibidor tipo Kunitz-BPTI (BmCI) identificado em análise de sequências expressas (ESTs) de hemócitos de Rhipicephalus (Boophilus) microplus infecta..., BP.DR
06/55887-6 - Estudos genômicos e proteômicos do trato digestivo do carrapato Rhipicephalus (Boophilus microplus) e determinação de antígenos imuno-responsivos ao antissoro de bovinos infestados, BP.PD - menos bolsas vinculadas
Assunto(s):Proteínas  Artrópodes  Coagulação sanguínea  Inibidores enzimáticos  Anticoagulantes 
Publicação FAPESP:http://www.fapesp.br/tematicos/saude_tanaka.pdf

Resumo

A diversidade de atividades biológicas presentes em artrópodes hematófagos, somada à importância destes como vetores de doenças, tem motivado o grupo a investigar a presença de novas moléculas anti-hemostáticas e inibidores de proteases, em três espécies de artrópodes com grande relevância no Brasil como transmissores de doenças em populações humanas e de animais de criação, sendo eles: o barbeiro Triatoma infestans, o carrapato bovino Boophilus microplus e o mosquito Aedes aegypti. Nos três casos, o uso indiscriminado de pesticidas para o controle destes vetores tem contaminado o meio-ambiente, a população humana e ao longo do tempo tem levado ao problema da resistência aos produtos químicos utilizados. A Organização Mundial de Saúde aponta como uma das causas do insucesso no combate às doenças transmitidas por estes ectoparasitas o desconhecimento da biologia destes animais. Portanto, maior compreensão dos diversos mecanismos que permitem tamanho sucesso adaptativo à hematofagia poderá revelar novos alvos para o desenvolvimento de estratégias de controle destes animais, através do desenvolvimento de vacinas ou de novas drogas. Ao longo dos últimos 8 anos o nosso grupo vem contribuindo para um melhor entendimento da bioquímica de alguns artrópodes hematófagos dentre eles o barbeiro T. infestans, que controla a coagulação sanguínea do seu hospedeiro utilizando inibidores de trombina e fator XIIa, e interessantemente produz estas proteínas na forma de uma única molécula precursora. Estudos utilizando o inibidor de fator XIIa permitiram a submissão de um processo de patente de anticoagulantes. Os nossos resultados recentes também mostram que inúmeros inibidores de serinoproteases de carrapato B. microplus e a mosca H. irritans podem apresentar diversas funções tais como controladores de enzimas endógenas e ou de microorganismos. No presente projeto temos como metas aprofundarmos os estudos de caracterização funcional e estrutural de diversas moléculas identificadas pelo grupo, lançando mão de ferramentas como: RNAi, PCR tempo real (RT-PCR), proteoma, testes antifúngicos, inibição de proteases de microorganismos, testes de coagulação de hemolinfa e ativação da cascata da fenoloxidase. Com estes esforços pretendemos contribuir no entendimento do papel destas moléculas na fisiologia destes hematófagos, assim como utilizar essas moléculas: para o estudo de interação proteína-proteína destes ectoparasitas, para desenvolvimento de vacinas e com potencial biotecnológico para utilização em medicinas humanas, veterinárias e agricultura. (AU)

Publicações científicas (20)
(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)
SOARES, TATIANE S.; OLIVEIRA, FELIPE; TORQUATO, RICARDO J. S.; SASAKI, SERGIO D.; ARAUJO, MARIANA S.; PASCHOALIN, THAYSA; TANAKA, APARECIDA S. BmTI-A, a Kunitz type inhibitor from Rhipicephalus microplus able to interfere in vessel formation. Veterinary Parasitology, v. 219, p. 44-52, MAR 30 2016. Citações Web of Science: 7.
SOARES, TATIANE SANCHES; SOARES TORQUATO, RICARDO JOSE; GONZALEZ, YAMILE GONZALEZ; ALVES LEMOS, FRANCISCO JOSE; TANAKA, APARECIDA SADAE. Production of serine protease inhibitors by mutagenesis and their effects on the mortality of Aedes aegypti L. larvae. PARASITES & VECTORS, v. 8, OCT 6 2015. Citações Web of Science: 1.
LU, STEPHEN; SOARES, TATIANE S.; VAZ JUNIOR, ITABAJARA S.; LOVATO, DIOGO V.; TANAKA, APARECIDA S. Rmcystatin3, a cysteine protease inhibitor from Rhipicephalus microplus hemocytes involved in immune response. Biochimie, v. 106, p. 17-23, NOV 2014. Citações Web of Science: 7.
ABREU, PATRICIA A.; SOARES, TATIANE S.; BUARQUE, DIEGO S.; TORQUATO, RICARDO S.; TANAKA, APARECIDA S. RmKK, a tissue kallikrein inhibitor from Rhipicephalus microplus eggs. Biochemical and Biophysical Research Communications, v. 449, n. 1, p. 69-73, JUN 20 2014. Citações Web of Science: 3.
BUARQUE, DIEGO S.; BRAZ, GLORIA R. C.; MARTINS, RAFAEL M.; TANAKA-AZEVEDO, ANITA M.; GOMES, CICERA M.; OLIVEIRA, FELIPE A. A.; SCHENKMAN, SERGIO; TANAKA, APARECIDA S. Differential Expression Profiles in the Midgut of Triatoma infestans Infected with Trypanosoma cruzi. PLoS One, v. 8, n. 5 MAY 2 2013. Citações Web of Science: 14.
SOARES, TATIANE SANCHES; SOARES TORQUATO, RICARDO JOSE; ALVES LEMOS, FRANCISCO JOSE; TANAKA, APARECIDA SADAE. Selective inhibitors of digestive enzymes from Aedes aegypti larvae identified by phage display. Insect Biochemistry and Molecular Biology, v. 43, n. 1, p. 9-16, JAN 2013. Citações Web of Science: 5.
SOARES, TATIANE SANCHES; OKUTA WATANABE, RENATA MIDORI; TANAKA-AZEVEDO, ANITA MITICO; SOARES TORQUATO, RICARDO JOSE; LU, STEPHEN; FIGUEIREDO, ANA CARVALHO; BARBOSA PEREIRA, PEDRO JOSE; TANAKA, APARECIDA S. Expression and functional characterization of boophilin, a thrombin inhibitor from Rhipicephalus (Boophilus) microplus midgut. Veterinary Parasitology, v. 187, n. 3-4, p. 521-528, JUL 6 2012. Citações Web of Science: 25.
CAMPOS, I. T. N.; SOUZA, T. A. C. B.; TORQUATO, R. J. S.; DE MARCO, R.; TANAKA-AZEVEDO, A. M.; TANAKA, A. S.; BARBOSA, J. A. R. G. The Kazal-type inhibitors infestins 1 and 4 differ in specificity but are similar in three-dimensional structure. ACTA CRYSTALLOGRAPHICA SECTION D-BIOLOGICAL CRYSTALLOGRAPHY, v. 68, n. 6, p. 695-702, JUN 2012. Citações Web of Science: 16.
SOARES, TATIANE S.; WATANABE, RENATA M. O.; LEMOS, FRANCISCO J. A.; TANAKA, APARECIDA S. Molecular characterization of genes encoding trypsin-like enzymes from Aedes aegypti larvae and identification of digestive enzymes. Gene, v. 489, n. 2, p. 70-75, DEC 10 2011. Citações Web of Science: 18.
LOVATO, DIOGO V.; AMINO, ROGERIO; GONZALEZ, YAMILE; MIRANDA, ANTONIO; SCHENKMAN, SERGIO; TANAKA, APARECIDA S. Infestin 1R, an intestinal subtilisin inhibitor from Triatoma infestans able to impair mammalian cell invasion by Trypanosoma cruzi. Experimental Parasitology, v. 129, n. 4, p. 362-367, DEC 2011. Citações Web of Science: 4.
CLARA, RENAN O.; SOARES, TATIANE S.; TORQUATO, RICARDO J. S.; LIMA, CASSIA A.; WATANABE, RENATA O. M.; BARROS, NILANA M. T.; CARMONA, ADRIANA K.; MASUDA, AOI; VAZ JUNIOR, ITABAJARA S.; TANAKA, APARECIDA S. Boophilus microplus cathepsin L-like (BmCL1) cysteine protease: Specificity study using a peptide phage display library. Veterinary Parasitology, v. 181, n. 2-4, p. 291-300, SEP 27 2011. Citações Web of Science: 13.
BUARQUE, DIEGO S.; SPINDOLA, LETICIA M. N.; MARTINS, RAFAEL M.; BRAZ, GLORIA R. C.; TANAKA, APARECIDA S. Tigutcystatin, a cysteine protease inhibitor from Triatoma infestans midgut expressed in response to Trypanosoma cruzi. Biochemical and Biophysical Research Communications, v. 413, n. 2, p. 241-247, SEP 23 2011. Citações Web of Science: 9.
SOARES‚ T.S.; WATANABE‚ R.M.O.; LEMOS‚ F.J.A.; TANAKA‚ A.S. Molecular characterization of genes encoding trypsin-like enzymes from< i> Aedes aegypti larvae and identification of digestive enzymes. GENESIS, v. 489, n. 2, p. 70-75, 2011.
WATANABE, RENATA M. O.; TANAKA-AZEVEDO, ANITA M.; ARAUJO, MARIANA S.; JULIANO, MARIA A.; TANAKA, APARECIDA S. Characterization of thrombin inhibitory mechanism of rAaTI, a Kazal-type inhibitor from Aedes aegypti with anticoagulant activity. Biochimie, v. 93, n. 3, p. 618-623, 2011. Citações Web of Science: 13.
DE MARCO, RENATO; AZZOLINI, SIMONE S.; LOVATO, DIOGO V.; TORQUATO, RICARDO J. S.; AMINO, ROGERIO; DE MIRANDA, ANTONIO; TANAKA, APARECIDA S. Validation of a Phage Display Method for Protease Inhibitor Selection Using SFTI and HiTI Synthetic Hybrid Peptides. COMBINATORIAL CHEMISTRY & HIGH THROUGHPUT SCREENING, v. 13, n. 9, p. 829-835, NOV 2010. Citações Web of Science: 2.
WATANABE, RENATA M. O.; SOARES, TATIANE S.; MORAIS-ZANI, KAREN; TANAKA-AZEVEDO, ANITA M.; MACIEL, CERES; CAPURRO, MARGARETH L.; TORQUATO, RICARDO J. S.; TANAKA, APARECIDA S. A novel trypsin Kazal-type inhibitor from Aedes aegypti with thrombin coagulant inhibitory activity. Biochimie, v. 92, n. 8, p. 933-939, AUG 2010. Citações Web of Science: 20.
DE MARCO, RENATO; LOVATO, DIOGO V.; TORQUATO, RICARDO J. S.; CLARA, RENAN O.; BUARQUE, DIEGO S.; TANAKA, APARECIDA S. The first pacifastin elastase inhibitor characterized from a blood sucking animal. Peptides, v. 31, n. 7, p. 1280-1286, JUL 2010. Citações Web of Science: 11.
LIMA, CASSIA A.; TORQUATO, RICARDO J. S.; SASAKI, SERGIO D.; JUSTO, GISELLE Z.; TANAKA, APARECIDA S. Biochemical characterization of a Kunitz type inhibitor similar to dendrotoxins produced by Rhipicephalus (Boophilus) microplus (Acari: Ixodidae) hemocytes. Veterinary Parasitology, v. 167, n. 2-4, SI, p. 279-287, FEB 10 2010. Citações Web of Science: 19.
SASAKI, SERGIO D.; LIMA, CÁSSIA A. DE; LOVATO, DIOGO V.; JULIANO, MARIA A.; TORQUATO, RICARDO J. S.; TANAKA, APARECIDA S. BmSI-7, a novel subtilisin inhibitor from Boophilus microplus, with activity toward Pr1 proteases from the fungus Metarhizium anisopliae. Experimental Parasitology, v. 118, n. 2, p. 214-220, Feb. 2008.

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