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Expressão de genes heterólogos em células de dípteros: biologia molecular e engenharia de processos

Processo: 02/09482-3
Linha de fomento:Auxílio à Pesquisa - Temático
Vigência: 01 de agosto de 2003 - 28 de fevereiro de 2010
Área do conhecimento:Ciências Biológicas - Bioquímica - Biologia Molecular
Pesquisador responsável:Carlos Augusto Pereira
Beneficiário:Carlos Augusto Pereira
Instituição-sede: Instituto Butantan. Secretaria da Saúde (São Paulo - Estado). São Paulo , SP, Brasil
Auxílios(s) vinculado(s):07/51026-9 - Metabolism evaluation of Drosophila melanogaster S2 cells cultivated in animal protein free media producing the G glycoprotein from rabies virus, AR.EXT
Bolsa(s) vinculada(s):07/52264-0 - Desenvolvimento de bioprocessos com células CHO e S2 em biorreatores para produção em larga escala de proteínas recombinantes, BP.MS
06/57794-5 - Desenvolvimento de bioprocesso para produção em larga escala de hormônios recombinantes e seus antagonistas em culturas de células CHO em biorreatores, BP.PD
05/51746-6 - Expressão da proteína viral (gvp - raiva) ou da proteína fluorescente (EGFP) em células de Drosophila melanogaster, BP.MS
+ mais bolsas vinculadas 05/56231-4 - Desenvolvimento de técnicas de otimização de bioprocesso no cultivo de células de inseto, BP.TT
03/08978-8 - Co-expressão de genes virais (GPV - raiva e HBsAg-hepatite B) com o gene da "Green Fluorescent Protein" (EGFP) em células de Drosophila melanogaster como instrumento de optimização de bioprocesso para produção de antígenos virais, BP.MS
03/12624-7 - Optimização do bioprocesso de cultura de células de drosófila (S2) transfectadas através de estudo de suas condições metabólicas, BP.IC
01/08914-4 - Expressão dos genes do vírus da hepatite B (HBsAg) e do vírus da raiva (GPV/PV) em células de drosófilas, BP.PD - menos bolsas vinculadas
Assunto(s):Virologia  Vírus da raiva  Imunologia  Hepatite B  Diptera 
Publicação FAPESP:http://www.fapesp.br/tematicos/saude_pereira.pdf

Resumo

O objetivo geral do projeto é a clonagem dos genes da glicoproteína G do vírus da raiva e do antígeno de superfície do vírus da hepatite B em vetores de expressão, para a construção de células de dípteros (S2 -Drosophila melanogaster) estavelmente transformadas que expressem estes genes de forma constitutiva e indutível (sub projeto 1) e a optimização do bioprocesso de produção em culturas celulares (sub projetos 2, 3 e 4). Esta será feita através de avaliação de propriedades antigênicas dos antígenos (sub projeto 1), optimização de meio de cultura (sub projeto 2), desenvolvimento de métodologia de purificação do produto (sub projeto 2), seleção de bioprocesso de cultura celular em bioreator (sub projeto 3) e elaboração de modelo matemático (sub projeto 4). Desta forma, com íntima associação de áreas da biologia, engenharia e matemática pretendemos propor de forma original, viável e completa um protocolo para produção de antígenos virais. (AU)

Matéria(s) publicada(s) na Agência FAPESP sobre o auxílio:
Laboratórios brasileiros desenvolvem bioprocessos a partir de células de drosófilas 

Publicações científicas (21)
(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)
SUAREZ-PATINO, SANDRA FERNANDA; MANCINI, RENATO ASTRAY; PEREIRA, CARLOS AUGUSTO; TORRES SUAZO, CLAUDIO ALBERTO; MENDONCA, RONALDO ZUCATELLI; CALIL JORGE, SORAIA ATTIE. Transient expression of rabies virus glycoprotein (RVGP) in Drosophila melanogaster Schneider 2 (S2) cells. Journal of Biotechnology, v. 192, n. A, p. 255-262, DEC 20 2014. Citações Web of Science: 5.
ROSSI, NICKELI; SILVA, BRUNA G.; ASTRAY, RENATO; SWIECH, KAMILLA; PEREIRA, CARLOS A.; SUAZO, CLAUDIO A. T. Effect of hypothermic temperatures on production of rabies virus glycoprotein by recombinant Drosophila melanogaster S2 cells cultured in suspension. Journal of Biotechnology, v. 161, n. 3, p. 328-335, OCT 31 2012. Citações Web of Science: 6.
MORAES, ANGELA M.; JORGE, SORAIA A. C.; ASTRAY, RENATO M.; SUAZO, CLAUDIO A. T.; CALDERON RIQUELME, CAMILO E.; AUGUSTO, ELISABETH F. P.; TONSO, ALDO; PAMBOUKIAN, MARILENA M.; PICCOLI, ROSANE A. M.; BARRAL, MANUEL F.; PEREIRA, CARLOS A. Drosophila melanogaster S2 cells for expression of heterologous genes: From gene cloning to bioprocess development. BIOTECHNOLOGY ADVANCES, v. 30, n. 3, p. 613-628, MAY-JUN 2012. Citações Web of Science: 33.
VENTINI, DANIELLA C.; DAMIANI, RENATA; SOUSA, ALVARO P. B.; DE OLIVEIRA, JOAO E.; PERONI, CIBELE N.; RIBELA, MARIA T. C. P.; BARTOLINI, PAOLO; TONSO, ALDO; SOARES, CARLOS R. J.; PEREIRA, CARLOS A. Improved Bioprocess with CHO-hTSH Cells on Higher Microcarrier Concentration Provides Higher Overall Biomass and Productivity for rhTSH. Applied Biochemistry and Biotechnology, v. 164, n. 4, p. 401-409, JUN 2011. Citações Web of Science: 2.
BATISTA, FABIANA R. X.; GRECO, KATIA N.; ASTRAY, RENATO M.; JORGE, SORAIA A. C.; AUGUSTO, ELISABETH F. P.; PEREIRA, CARLOS A.; MENDONCA, RONALDO Z.; MORAES, ANGELA M. Behavior of Wild-type and Transfected S2 Cells Cultured in Two Different Media. Applied Biochemistry and Biotechnology, v. 163, n. 1, p. 1-13, JAN 2011. Citações Web of Science: 5.
VENTINI, DANIELLA CRISTINA; ASTRAY, RENATO MANCINI; NOBRE LEMOS, MARCOS ALEXANDRE; CALIL JORGE, SORAIA ATTIE; CALDERON RIQUELME, CAMILO; TORRES SUAZO, CLAUDIO ALBERTO; TONSO, ALDO; PEREIRA, CARLOS AUGUSTO. Recombinant rabies virus glycoprotein synthesis in bioreactor by transfected Drosophila melanogaster S2 cells carrying a constitutive or an inducible promoter. Journal of Biotechnology, v. 146, n. 4, p. 169-172, APR 15 2010. Citações Web of Science: 16.
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BATISTA‚ F.R.X.; PEREIRA‚ C.A.; MENDONÇA‚ R.Z.; MORAES‚ A.M. Enhancement of Sf9 cells and baculovirus production employing Grace’s medium supplemented with milk whey ultrafiltrate. Cytotechnology, v. 49, n. 1, p. 1-9, 2005.
RODAS‚ V.M.; MARQUES‚ F.H.; HONDA‚ M.T.; SOARES‚ D.M.; JORGE‚ S.A.C.; ANTONIAZZI‚ M.M.; MEDUGNO‚ C.; CASTRO‚ M.E.B.; RIBEIRO‚ B.M.; SOUZA‚ M.L.; OTHERS. Cell culture derived AgMNPV bioinsecticide: biological constraints and bioprocess issues. Cytotechnology, v. 48, n. 1, p. 27-39, 2005.

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