Sinalização heterotípica entre células epiteliais tumorais e fibroblastos no carcinoma de mama

• Processo: 04/04607-8
• Modalidade de apoio: Auxílio à Pesquisa - Temático
• Vigência: 01 de maio de 2005 - 31 de julho de 2008
• Área do conhecimento: Ciências da Saúde - Medicina - Clínica Médica
• Pesquisador responsável: Maria Mitzi Brentani
• Beneficiário: Maria Mitzi Brentani
• Instituição Sede: Faculdade de Medicina (FM). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
• Auxílios(s) vinculado(s): 06/60380-8 - Caracterizacao molecular de fibroblastos originarios de tecido mamario neoplasico ou adjacentes a tecido mamario normal de doencas benignas de mama., AR.EXT
• Bolsa(s) vinculada(s): 07/52140-0 - Analise do perfil de expressao genica de linhagens tumorais luminais mamarias humanas submetidas ao tratamento com rapamicina associada a doxorrubicina., BP.MS; 07/51502-5 - Genes regulados por estrogeno em fibroblastos associados ao cancer de mama., BP.IC; 06/01331-7 - Estudo do papel funcional dos genes SPG7 e SPRED2 em células mamárias humanas utilizando cultura de células 2D e 3D, BP.PD; 05/56048-5 - Sinalizacao heterotipica entre celulas epiteliais tumorais e fibroblastos no carcinoma de mama., BP.TT; 05/51593-5 - Caracterização molecular de fibroblastos originários de tecido mamário neoplásico ou não e modificação do perfil gênico após interação com células epiteliais mamárias e validação de genes diferencialmente expressos, BP.PD
• Assunto(s): Neoplasias mamárias Carcinoma Metástase neoplásica Fibroblastos
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Cancer De Mama | Co Cultura | Fibroblastos | Gch | Microarray | Sage

Resumo

Durante a transformação e progressão do carcinoma de mama a homeostase entre as células epiteliais e as estromais adjacentes se desregula e os fibroblastos tumorais apresentam várias propriedades alteradas tais como o potencial proliferativo e a produção de elementos da membrana basal. Em contrapartida o microambiente afeta a velocidade de crescimento do tumor, invasividade e capacidade de metástase. Os principais objetivos são, analisar o conjunto de genes modificados em fibroblastos e células tumorais envolvidas na interação tumor-estroma. O primeiro passo será obter fibroblastos de tumor de mama em estadiamentos diferentes por cultura ou dissecção a laser, extrair o RNA e pela técnica de SAGE determinar o perfil gênico individual destes diferentes fibroblastos. Genes diferencialmente expressos em relação a fibroblastos obtidos de mamoplastia serão selecionados e validados por PCR. O perfil cromossômico dos fibroblastos será obtido pela técnica da hibridização genômica comparativa (GCH). Para a verificação da sinalização heterotípica, co-culturas de fibroblastos de tumor e células mamárias normais ou vice-versa serão estabelecidas e após a separação destas células por beads específicos, o RNA será extraído, amplificado e colocado em lâminas de array fornecidas pelo Instituto Ludwig de Pesquisa sobre o Câncer ou um número limitado de genes, identificado pela análise anterior de SAGE, será comparado por Real Time PCR. A transição epitélio-mesenquima será analisada retrospectivamente em um conjunto de blocos de parafina correspondendo vários estágios tumorais, através da técnica de imunohistoquímica, utilizando anticorpos conta algumas proteínas já conhecidas e outras advindas das análises anteriores. Dois outros aspectos serão investigados: 1) a regulação por estrógenos dos genes expressos em fibroblastos através da técnica de cultura de órgãos; 2) identificação no papel funcional de alguns genes diferencialmente expressos em células de câncer de mama antes e após a adesão a uma camada de laminina. (AU)

Publicações científicas

(6)

(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)

LOGULLO, ANGELA FLAVIA; NONOGAKI, SUELY; PASINI, FATIMA SOLANGE; BUENO DE TOLEDO OSORIO, CYNTHIA APARECIDA; SOARES, FERNANDO AUGUSTO; BRENTANI, M. MITZI. Concomitant expression of epithelial-mesenchymal transition biomarkers in breast ductal carcinoma: Association with progression. ONCOLOGY REPORTS, v. 23, n. 2, p. 313-320, FEB 2010. (04/04607-8)

ROZENCHAN, PATRICIA BORTMAN; PASINI, FATIMA SOLANGE; ROELA, ROSIMEIRE A.; HIRATA KATAYAMA, MARIA LUCIA; LOPES MUNDIM, FIORITA GONZALES; BRENTANI, HELENA; LYRA, EDUARDO C.; BRENTANI, MARIA MITZI. Specific upregulation of RHOA and RAC1 in cancer-associated fibroblasts found at primary tumor and lymph node metastatic sites in breast cancer. TUMOR BIOLOGY, v. 36, n. 12, p. 9589-9597, DEC 2015. (05/60333-7, 14/03090-3, 05/51593-5, 04/04607-8, 09/10088-7)

A.C. MARCHIORI; D.A. CASOLARI; M.A. NAGAI. Transcriptional up-regulation of PHLDA1 by 17β-estradiol in MCF-7 breast cancer cells. Brazilian Journal of Medical and Biological Research, v. 41, n. 7, p. 579-582, 2008-06-30. (06/01026-0, 04/04607-8)

MARCHIORI, A. C.; CASOLARI, D. A.; NAGAI, M. A.. Transcriptional up-regulation of PHLDA1 by 17 beta-estradiol in MCF-7 breast cancer cells. Brazilian Journal of Medical and Biological Research, v. 41, n. 7, p. 579-582, JUL 2008. (04/04607-8, 06/01026-0)

LOGULLO, ANGELA FLAVIA; AGATA STIEPCICH, MONICA MARIA; BUENO DE TOLEDO OSORIO, CINTIA APARECIDA; NONOGAKI, SUELI; PASINI, FATIMA SOLANGE; ROCHA, RAFAEL MALAGOLI; SOARES, FERNANDO AUGUSTO; BRENTANI, MARIA M.. Role of Fos-related antigen 1 in the progression and prognosis of ductal breast carcinoma. Histopathology, v. 58, n. 4, p. 617-625, MAR 2011. (04/04607-8)

ROZENCHAN, PATRICIA BORTMAN; CARRARO, DIRCE MARIA; BRENTANI, HELENA; DE CARVALHO MOTA, LOUISE DANIELLE; BASTOS, ELEN PEREIRA; NAPOLITANO E FERREIRA, ELISA; TORRE, CESAR H.; HIRATA KATAYAMA, MARIA LUCIA; ROELA, ROSIMEIRE APARECIDA; LYRA, EDUARDO C.; et al. Reciprocal changes in gene expression profiles of cocultured breast epithelial cells and primary fibroblasts. International Journal of Cancer, v. 125, n. 12, p. 2767-2777, DEC 15 2009. (04/04607-8, 01/13515-1, 05/51593-5)