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Bases moleculares da especificidade enzimatica.

Processo: 01/08198-7
Linha de fomento:Auxílio à Pesquisa - Regular
Vigência: 01 de janeiro de 2002 - 31 de janeiro de 2004
Área do conhecimento:Ciências Biológicas - Bioquímica - Enzimologia
Pesquisador responsável:Sandro Roberto Marana
Beneficiário:Sandro Roberto Marana
Instituição-sede: Instituto de Química (IQ). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
Assunto(s):Glicosídeo hidrolases  Especificidade  Enzimas  beta-Glicosidases 

Resumo

A especificidade de uma enzima é função das interações não-covalentes entre os aminoácidos do sítio ativo e o estado de transição da reação. Logo a modificação planejada da especificidade de uma enzima depende do conhecimento do comportamento da energia das interações não-covalentes em função da troca dos aminoácidos do sítio ativo. Este projeto se propõe a obter esta informação para uma beta-glicosidase. Para tal esta enzima será expressa como proteína recombinante, aminoácidos do sítio ativo serão substituídos via mutação sítio-dirigida, as enzimas mutantes serão purificadas e as energias de interações não-covalentes no complexo ESI serão determinadas a partir de constantes de velocidade obtidas em experimentos de cinética enzimática. Assim este projeto contribui para compreensão da especificidade das enzimas em geral, o que tem implicações na construção de enzimas com especificidade pré-planejadas, no desenho de inibidores e previsão da função de enzimas a partir de sua estrutura primária e terciária. (AU)

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