Estudos moleculares do Trypanosoma cruzi e de sua interação com células e fatores do hospedeiro in vitro e in vivo

• Processo: 06/61450-0
• Modalidade de apoio: Auxílio à Pesquisa - Temático
• Data de Início da vigência: 01 de agosto de 2007
• Data de Término da vigência: 31 de outubro de 2011
• Área do conhecimento: Ciências Biológicas - Parasitologia - Protozoologia de Parasitos
• Pesquisador responsável: José Franco da Silveira Filho
• Beneficiário: José Franco da Silveira Filho
• Instituição Sede: Escola Paulista de Medicina (EPM). Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP). Campus São Paulo. São Paulo , SP, Brasil
• Pesquisadores principais: Nobuko Yoshida ; Renato Arruda Mortara
• Bolsa(s) vinculada(s): 11/03357-1 - Caracterização do perfil de expressão de epítopos e infectividade de amastigotas extracelulares de diferentes isolados de Trypanosoma cruzi, BP.MS; 10/13468-2 - Duplo papel da Amastina durante a invasão celular de amastigota extracelular e multiplicação intracelular do Trypanosoma cruzi in vitro e in vivo, BP.MS; 10/16332-4 - Estrutura e organização das regiões teloméricas e subteloméricas de Trypanosoma cruzi, BP.IC; + mais bolsas vinculadas 10/13404-4 - ESTUDOS DA PARTICIPAÇÃO DE UMA PROTEÍNA DE 21 kDa NA INVASÃO DE CÉLULAS IN VITRO E IN VIVO POR FORMAS AMASTIGOTAS EXTRACELULARES DE Trypanosoma cruzi., BP.IC; 09/14693-2 - "Construção de mapas físicos dos cromossomos do clone CL Brener de T. cruzi", BP.TT; 08/57965-0 - Caracterizacao estrutural e funcional de uma nova familia de proteinas de membrana ("procyclic form surface glycoprotein") de trypanosoma cruzi, BP.IC; 08/57419-5 - Caracterizacao molecular da familia de proteinas sap ("serine-, alanine-, and proline-rich protein") de trypanosoma cruzi e seu papel na invasao de celulas de mamifero, BP.IC; 07/57440-1 - Estudos da invasao de celulas em cultura por formas amastigotas extracelulares de trypanosoma cruzi: possivel envolvimento da proteina amastina como modulador negativo da invasao., BP.IC; 08/51356-1 - Colonizacao de celulas knock-out para as proteinas lisossomais lamp-1 e lamp-2 pela bacteria coxiella burnetii., BP.IC; 07/58593-6 - Estudo da variabilidade genetica de antigenos de superficie gp82 e gp90 de tripomastigotas metaciclicos de trypanosoma cruzi: identificacao do repertorio dos transcritos por hibridizacao em..., BP.DR; 07/56210-2 - Papel de peptídeos e proteínas com atividade lítica na invasão celular e diferenciação de Trypanosoma cruzi, BP.PD; 07/59618-2 - Estudo dos mecanismos de regulacao pos-transcricional em trypanosoma cruzi (cepa g) utilizando como modelo o gene do transportador de hexose., BP.IC; 07/55456-8 - Variabilidade antigenica em trypanosoma cruzi:estudo dos mecanismos de geracao de variantes antigenos de superficie g85 por recombinacao envolvendo as extremidades cromossomicas., BP.PD - menos bolsas vinculadas
• Assunto(s): Genomas Variação genética Doença de Chagas Trypanosoma cruzi
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Antigenos De Superficie | Doenca De Chagas | Interacao Patogeno/Hospedeiro | Invacao Celular | Trypanosoma Cruzi | Variabilidade Genetica
• Publicação FAPESP: https://www.fapesp.br/tematicos/saude_silveirafilho.pdf

Resumo

O Trypanosoma cruzi, o agente etiológico da doença de chagas, é um organismo de grande interesse médico e biológico. Embora a transmissão da doença de chagas esteja controlada nos Países do Cone Sul, o T. cruzi continua a ser transmitido em muitos Países da América Latina infectando 15-16 milhões de pessoas. Surtos de casos agudos de doença de chagas, por infecção oral, vêm ocorrendo em diferentes regiões do Brasil. A invasão da célula hospedeira pelo T. cruzi é uma etapa crucial na instalação da infecção no homem e hospedeiro vertebrados. A invasão de células de mamíferos por tripomastigotas metacíclicos e amastigotas do T. cruzi tem sido intensamente estudada pelo nosso grupo, inclusive a infecção oral in vivo e in vitro. Identificamos várias moléculas do parasita e estruturas da célula hospedeira que interagem na invasão e demonstramos que as diferentes formas do parasita infectam a célula hospedeira por mecanismos distintos. Tripomastigotas metacíclicos e amastigotas expressam na superfície moléculas estágio-específico, que lhes conferem propriedades para interações celulares diferenciadas. Os genes codificadores de proteínas de superfície estágio-específico foram clonados e caracterizados. Neste projeto temático pretendemos estudar, aos níveis moleculares e celulares, a interação entre o T. cruzi com células e fatores do hospedeiro in vitro e in vivo. O projeto envolve o estudo de moléculas e estruturas celulares previamente caracterizadas pelo nosso grupo assim como a identificação de novos componentes moleculares e celulares. Enfoque especial será dado à identificação na célula de mamíferos de receptores para as proteínas de superfície de formas metacíclicas e amastigotas. O tráfego intracelular do T. cruzi e as vias de sinalização serão estudados em modelos de co-infecção com outros tripanossomas e bactérias invasoras assim como em células de mamíferos transfectadas com diferentes genes. Os antígenos de superfície de tripomastigotas metacíclicos são codificados por famílias multigênicas. Pretendemos identificar os genes transcritos e traduzidos nas formas metacíclicas pelas técnicas de hibridização em micro arranjos de DNA e seqüenciamento parcial das proteínas por espectrometria de massa, respectivamente. Os mecanismos de recombinação responsáveis pela geração de variantes destas famílias multigênicas serão estudados em parasitas transfectados com cromossomos artificiais de T. cruzi, especialmente construídos para esta finalidade. Estes estudos poderão dar novas informações sobre os mecanismos de controle da expressão gênica neste parasita e sobre a evolução das famílias multigênicas. O projeto apresentado é essencialmente multidisciplinar, focado no estudo da infecção do hospedeiro vertebrado pelo T. cruzi. A equipe proponente incluí pesquisadores com larga experiência em Biologia molecular, Biologia celular, Imunologia, Microscopia confocal e Eletrônica que vem trabalhando há vários anos, de maneira bastante produtiva, em programas de pesquisa conjuntos. Pretendemos com a colaboração de pesquisadores no Brasil e no exterior, viabilizar o projeto proposto. (AU)

Publicações científicas

(7)

(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)

MAEDA, FERNANDO YUKIO; ALVES, RENAN MELATTO; CORTEZ, CRISTIAN; LIMA, FABIO MITSUO; YOSHIDA, NOBUKO. Characterization of the infective properties of a new genetic group of Trypanosoma cruzi associated with bats. Acta Tropica, v. 120, n. 3, p. 231-237, DEC 2011. (06/61450-0)

STAQUICINI, DANIELA I.; MARTINS, RAFAEL M.; MACEDO, SILENE; SASSO, GISELA R. S.; ATAYDE, VANESSA D.; JULIANO, MARIA A.; YOSHIDA, NOBUKO. Role of GP82 in the Selective Binding to Gastric Mucin during Oral Infection with Trypanosoma cruzi. PLoS Neglected Tropical Diseases, v. 4, n. 3, p. e613, 2010. (06/61450-0)

CORTEZ, CRISTIAN; YOSHIDA, NOBUKO; BAHIA, DIANA; SOBREIRA, TIAGO J. P.. Structural Basis of the Interaction of a Trypanosoma cruzi Surface Molecule Implicated in Oral Infection with Host Cells and Gastric Mucin. PLoS One, v. 7, n. 7, JUL 31 2012. (06/61450-0)

MARTINS, RAFAEL MIYAZAWA; ALVES, RENAN MELATTO; MACEDO, SILENE; YOSHIDA, NOBUKO. Starvation and rapamycin differentially regulate host cell lysosome exocytosis and invasion by Trypanosoma cruzi metacyclic forms. Cellular Microbiology, v. 13, n. 7, p. 943-954, JUL 2011. (06/61450-0)

MARTINS, RAFAEL MIYAZAWA; COVARRUBIAS, CHARLES; ROJAS, ROBERT GALVEZ; SILBER, ARIEL MARIANO; YOSHIDA, NOBUKO. Use of L-Proline and ATP Production by Trypanosoma cruzi Metacyclic Forms as Requirements for Host Cell Invasion. Infection and Immunity, v. 77, n. 7, p. 3023-3032, JUL 2009. (06/61450-0)

CORTEZ, CRISTIAN; MARTINS, RAFAEL M.; ALVES, RENAN M.; SILVA, RICHARD C.; BILCHES, LUCIANA C.; MACEDO, SILENE; ATAYDE, VANESSA D.; KAWASHITA, SILVIA Y.; BRIONES, MARCELO R. S.; YOSHIDA, NOBUKO. Differential Infectivity by the Oral Route of Trypanosoma cruzi Lineages Derived from Y Strain. PLoS Neglected Tropical Diseases, v. 6, n. 10, OCT 2012. (06/61450-0)

CRUZ, MARIO C.; SOUZA-MELO, NORMANDA; DA SILVA, CLAUDIO VIEIRA; DAROCHA, WANDERSON DUARTE; BAHIA, DIANA; ARAUJO, PATRICIA R.; TEIXEIRA, SANTUZA R.; MORTARA, RENATO A.. Trypanosoma cruzi: Role of delta-Amastin on Extracellular Amastigote Cell Invasion and Differentiation. PLoS One, v. 7, n. 12, DEC 18 2012. (11/51475-3, 06/61450-0, 07/50551-2)