Caracterização de ribonucleoproteínas (U1, U2, U5 e u6 snRNPs) em diferentes cepas de Trypanosoma cruzi

• Processo: 04/01630-9
• Modalidade de apoio: Auxílio à Pesquisa - Regular
• Data de Início da vigência: 01 de setembro de 2004
• Data de Término da vigência: 28 de fevereiro de 2007
• Área do conhecimento: Ciências Biológicas - Bioquímica - Biologia Molecular
• Pesquisador responsável: Regina Maria Barretto Cicarelli
• Beneficiário: Regina Maria Barretto Cicarelli
• Instituição Sede: Faculdade de Ciências Farmacêuticas (FCFAR). Universidade Estadual Paulista (UNESP). Campus de Araraquara. Araraquara , SP, Brasil
• Assunto(s): Trans-splicing Trypanosoma cruzi
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Proteinas Sm | Trans-Splicing | Trypanosoma Cruzi | Usnrnps

Resumo

As ribonucleoproteínas (UsnRNPs), pequenos complexos de RNA e proteínas exercem um papel essencial no processamento do pré-mRNA, principalmente durante o processo de splicing (corte de íntrons e união de éxons). As UsnRNPs apresentam um core de proteínas comuns associadas entre si e com o próprio snRNA denominadas de proteínas Sm e proteínas específicas de cada snRNP, cuja extremidade 5 possui um cap m3G. Como as snRNPs ainda não estão bem caracterizadas em T. cruzi, este trabalho propõe a caracterização das mesmas, utilizando reações de imunoprecipitação com RNA total de formas epimastigotas de T. cruzi e anticorpo anti-m3G, que permitem a separação dos snRNAs, os quais serão clonados e sequenciados após reação de RT-PCR. A seguir, serão realizadas análises do requerimento dos UsnRNAs na reação de trans-splicing com o uso de células permeáveis desses parasitas. As proteínas Sm serão separadas em gel 2D, e localizadas por Western blotting utilizando anticorpo anti-Sm, para posterior análise por espectrometria de massa. (AU)

Publicações científicas

(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)

C.F. BARBOSA; E.S. OKUDA; M.C. CHUNG; E.I. FERREIRA; R.M.B. CICARELLI. Rapid test for the evaluation of the activity of the prodrug hydroxymethylnitrofurazone in the processing of Trypanosoma cruzi messenger RNAs. Brazilian Journal of Medical and Biological Research, v. 40, n. 1, p. 33-39, 2006-12-13. (04/01630-9, 03/05791-4, 99/11393-4, 01/01192-3)

DL AMBRÓSIO; MTA SILVA; RMB CICARELLI. Cloning and molecular characterization of Trypanosoma cruzi U2, U4, U5, and U6 small nuclear RNAs. Memórias do Instituto Oswaldo Cruz, v. 102, n. 1, p. 97-106, 2007-02-00. (04/01630-9, 99/11393-4)